[發明專利]愛帕琳融合蛋白和其用途

在審

• 申請號: 201480010429.7
• 申請日: 2014-03-14
• 公開（公告）號: CN105026423A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: P·史蒂維斯;J·科洛馬達;A·墨菲
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;A61K38/10;A61K38/17;C07K7/08
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

相關申請的交叉引用

本申請根據35USC§119(e)要求2013年3月14日提交的美國臨時專利申請號61/786,172的權益，并且根據35USC§119(e)要求2013年11月20日提交的美國臨時專利申請號61/906,567的權益，所述申請各自明確以引用的方式整體并入本文。

序列表

本申請以引用的方式并入以計算機可讀形式遞交的序列表，即2014年3月13日創建的文件8050WO_ST25.txt(43,420字節)。

發明領域

本發明涉及用融合至愛帕琳(apelin)肽的N端或C端的多聚組分(如人類免疫球蛋白Fc結構域)工程改造的融合蛋白。本發明的重組蛋白和其組合物適用于治療心血管疾病、缺血-再灌注、糖尿病以及其它愛帕琳相關療法。

發明背景

愛帕琳前體肽原是在人類CNS和外周組織(例如，肺、心臟以及乳腺)中表達的77氨基酸蛋白。包含變化大小的愛帕琳肽的C端片段的肽已顯示激活G蛋白偶聯受體APJ受體(Habata等人，1999，Biochem?Biophys?Acta?1452：25-35；Hosoya等人，2000，JBC，275(28)：21061-67；Lee等人，2000，J?Neurochem?74：34-41；Medhurst等人，2003，J?Neurochem?84：1162-1172)。多項研究指出，愛帕琳肽和類似物通過其與APJ受體(也稱為APLNR)的相互作用傳達心血管作用，如內皮依賴性血管舒張(Tatemoto等人，2001，Regul?Pept?99：87-92)、正性肌力作用(Szokodi等人，2002，Circ?Res?91：434-440；Maguire等人，2009，Hypertension?54：598-604，2009年7月13日在印刷版之前電子出版)以及心肌局部缺血和再灌注(Pisarenko等人，2013，J?Pharmacol?Pharmacother.“Effects?of?structural?analogues?of?apelin-12?in?acute?myocardial?infarction?in?rats”，印刷版之前的電子版)。具體說來，愛帕琳-13是可能通過增加心臟收縮性來提供心力衰竭的治療的有效肌力劑(Dai等人，2006，Eur?J?Pharmacol?553(1-3)：222-228；Maquire等人，2009，Hypertension.54：598-604)。

人類患者中手術前和手術后心室組織的轉錄表達譜披露APLNR是最顯著上調的基因(Chen等人，2003，Circulation，108：1432-39)。小鼠中的愛帕琳(愛帕琳^-/-)和APJ(APJ^-/-)基因敲除研究表明，內源性愛帕琳-APJ途徑的缺乏導致響應心血管應激(如鍛煉)的能力降低(Charo等人，2009，Am?J?Physiol.Heart?Circ.Physiol.，297：H1904-1913)。

愛帕琳也已經在糖尿病和肥胖相關病癥的胰島素調節和機理中有所報道。在肥胖的小鼠模型中，愛帕琳是從脂肪細胞釋放并且直接地通過胰島素上調(Boucher等人，2005，Endocrinol?146：1764-71)。愛帕琳基因敲除小鼠證明減弱的胰島素敏感性(Yue等人，2010，Am?J?Physiol?Endocrinol?Metab?298：E59-E67)。

APLNR調節劑也在HIV治療中發現效用，因為合成愛帕琳肽抑制HIV-1進入CD4-APLNR表達細胞中(Cayabyab，M.等人，2000，J.Virol.74：11972-11976)。此外，APLNR抑制劑(即，能夠阻斷病理性血管生成)可適用于抑制視網膜中的腫瘤生長或血管形成(Kojima，Y.和Quertermous，T.，2008，Arterioscler?Thromb?Vasc?Biol；28；1687-1?688；Rayalam，S.等人2011，Recent?Pat?Anticancer?Drug?Discov?6(3)：367-72)。愛帕琳神經保護也在其中愛帕琳-13、愛帕琳-17以及愛帕琳-36通過信號傳導途徑起作用之處可見以促進神經元存活(Cheng，B等人，2012，Peptides?37(1)：171-3)。