[實用新型]一種高效免疫印跡反應器有效
| 申請號: | 201420563089.8 | 申請日: | 2014-09-28 |
| 公開(公告)號: | CN204188614U | 公開(公告)日: | 2015-03-04 |
| 發明(設計)人: | 曹亮 | 申請(專利權)人: | 南京鐘鼎生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/544 | 分類號: | G01N33/544 |
| 代理公司: | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人: | 賀翔 |
| 地址: | 210000 江蘇省南京市六合區*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高效 免疫 印跡 反應器 | ||
技術領域
本實用新型涉及一種在免疫印跡(Western?Blot)實驗中用于將硝酸纖維素膜與抗體溶液共孵育及洗雜的裝置,具體涉及一種高效免疫印跡反應器。?
背景技術
免疫印跡實驗是當前生物科研中常用技術,在實驗中蛋白質經聚丙烯酰胺凝膠電泳后被轉移并固定在硝酸纖維素膜上,將硝酸纖維素膜與蛋白特異性抗體溶液共孵育后,經漂洗去除未反應的抗體,加入二抗孵育洗滌顯色等步驟即可觀察抗體與蛋白中特異抗原成份的結合,其中,硝酸纖維素膜與抗體溶液共孵育是實驗的關鍵步驟之一(在這一步驟中使用的抗體是珍貴且昂貴的消耗性試劑,需盡量節省使用),但是抗體溶液必須達到一定濃度才可使實驗達到滿意效果,所以,節省抗體的重要方法之一是減小抗體溶液的使用體積,使硝酸纖維素膜剛好完整浸沒于抗體溶液之中即可。?
目前,抗體孵育步驟多在密封塑料袋或盒狀容器中進行,使用密封塑料袋的優點是:袋的大小可根據硝酸纖維素膜的大小任意裁切,將孵育面積降至最低限度(僅比膜面積稍大),但使用密封塑料袋時很難保證沒有氣泡被封入袋中,因抗體溶液粘稠度較大,表面張力較高,即使在搖床上不停搖動,被封入袋中的氣泡仍有可能粘附于膜表面特定位置,而造成該位置與抗體反應不夠充分,影響試驗質量;在盒狀容器中進行孵育時,抗體溶液流動較好,易于保證膜表面各處與抗體接觸的均一性,但在搖床的晃動下,硝酸纖維素膜容易漂浮起來,使部分膜表面脫離抗體溶液而暴露與空氣中,在實際操作中,經常不得不加大抗體溶液體積以獲得更好的液體流動性來解決這一問題,而較大的體溶液體積意味著更多的抗體消耗,另外因各批次試驗樣品數量不一、膜的大小不等,在現實中很難準備多個大小不等的盒子以適應膜的大小(通常都是使用一個較大的盒子),這樣當膜的面積較小時又造成了抗體的浪費;抗體孵育每次需要在37度條件下震蕩反應1小時,一般免疫印跡一抗反應洗滌后還需二抗反應,共需要2小時,抗體孵育完成后需要用洗滌液反復漂洗硝酸纖維素膜,去除未結合的抗體,一般需要洗滌4-5次,每次5-10分鐘,當前抗體孵育洗滌步驟繁瑣耗時且浪費試劑。?
因此,基于上述問題,本實用新型提供一種簡單、易用的高效免疫印跡反應?器。?
實用新型內容
實用新型目的:本實用新型的目的一種高效免疫印跡反應器,一方面通過負壓作用于抗體溶液和洗滌溶液穿透硝酸纖維薄膜,從而達到快速反應和洗滌的目的,另一方面抗體溶液和洗滌溶液通過吸附在微孔海綿墊上以減少試劑用量,密閉容器通過負壓將海綿墊中的溶液擠壓穿透硝酸纖維薄膜,達到反應和洗滌的目的,較傳統的浸泡法反應、清洗效率高。?
技術方案:一種高效免疫印跡反應器,包括盒體,及設置在盒體上的盒蓋,及設置在盒體內底部的過濾層,及與盒體底部連接廢液連接管,及與廢液連接管連接的廢液收集皿,及通過抽真空連接管與廢液收集皿連接的抽真空裝置。?
本技術方案的,所述盒體為透明有機玻璃。?
本技術方案的,所述設置在盒體內底部的過濾層為石英砂濾墊,其厚度為0.3-0.5cm。?
本技術方案的,所述盒體底部連接廢液連接管為漏斗狀。?
本技術方案的,所述抽真空裝置為小型雙級旋片式真空泵。?
與現有技術相比,本實用新型的一種高效免疫印跡反應器的有益效果在于:1、結構簡單、外形美觀;2、一方面通過負壓作用于抗體溶液和洗滌溶液穿透硝酸纖維薄膜,從而達到快速反應和洗滌的目的,另一方面抗體溶液和洗滌溶液通過吸附在微孔海綿墊上以減少試劑用量,密閉容器通過負壓將海綿墊中的溶液擠壓穿透硝酸纖維薄膜,達到反應和洗滌的目的,較傳統的浸泡法反應、清洗效率高。?
附圖說明
圖1是本實用新型一種高效免疫印跡反應器的結構示意圖;?
其中圖中序號如下:1-盒蓋、2-盒體、3-過濾層、4-廢液連接管、5-廢液收集皿、6-抽真空裝置、7-抽真空連接管。?
具體實施方式
下面結合附圖和具體實施例,進一步闡明本實用新型。?
如圖1所示的一種高效免疫印跡反應器,包括盒體2,及設置在盒體2上的盒蓋1,及設置在盒體2內底部的過濾層3,及與盒體2底部連接廢液連接管4,?及與廢液連接管4連接的廢液收集皿5,及通過抽真空連接管7與廢液收集皿5連接的抽真空裝置6。?
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