[發明專利]集診斷和治療于一體的納米聚合物膠束載體的制備方法

在審

• 申請號: 201410836982.8
• 申請日: 2014-12-29
• 公開（公告）號: CN104784712A
• 公開（公告）日: 2015-07-22
• 發明（設計）人: 王巧英;魏清榮;魯建
• 申請（專利權）人: 王巧英
• 主分類號: A61K49/18
• 分類號: A61K49/18;A61K49/12;A61K45/00;A61K9/107;A61K47/34;A61P35/00
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

技術領域

本發明涉及一種集診斷和治療于一體的納米聚合物膠束載體的制備方法，具體涉及一種具有主動靶向功能的，同時裝載疏水性抗腫瘤藥物和磁共振分子影像探針的雙功能納米聚合物膠束體系的制備。這種納米聚合物膠束體系在藥物釋放、腫瘤早期診斷、靶向分子探針、磁共振影像示蹤、療效評估等生物醫學工程領域具有廣闊的應用前景。

背景技術

全世界每年約有600萬人死于惡性腫瘤，中國現有癌癥患者約450萬人，死亡率約30％，且呈逐年遞增的趨勢。腫瘤的非手術治療包括放療和化療，均以殺死腫瘤細胞為目的，但它們最大的弊端由于缺乏對腫瘤細胞的特異性識別，所以治療時將腫瘤細胞和正常細胞一并殺死，為了克服腫瘤治療中的瓶頸問題，目前國內外眾多學者致力于研究“腫瘤靶向傳遞系統”。

在“腫瘤靶向傳遞系統”的研究中，由于納米粒子的微小體積和特殊結構，可以對藥物在體內的分布、吸收、排除等行為達成控制，其作為藥物載體具有特殊的優勢。由于腫瘤組織自身的特征：如血管網豐富、血管內皮疏松、淋巴管缺乏等，使納米粒子容易從血管中進入腫瘤組織局部而不易被淋巴管吸收返回到血液循環系統，通過這種增強的滲透及滯留作用(enhanced?permeability?and?retention，EPR)，納米粒子可以在腫瘤局部聚集從而獲得被動靶向功能。同時，對納米粒子可以進行表面化學修飾后易偶聯或吸附適當的配體(包括抗體、半抗原、糖、葉酸等)，利用配體與細胞表面受體特異性結合的原理，以提高納米載體對靶目標的特異性及敏感性，從而實現靶向診斷或治療。2005年美國政府撥款10億元用于納米技術的研究，這比用于人類基因組測序的昂貴費用多2倍多。在我國納米技術的發展也是方興未艾，日新月異。

在眾多的研究中利用聚合物納米膠束進行抗癌藥物及影像對比劑的靶向傳輸已經成為一個熱門的研究領域。在納米膠束外殼的構造方面，聚乙二醇(PEG)是迄今所發現的生理性能較好的一種聚合物，它具有高度的親水性、良好的生物相容性、并可顯著減少蛋白黏附、網狀內皮系統的吸收和吞噬細胞的吞噬，從而延長納米膠束在體內的循環時間。在聚合物膠束結構的設計中，常采用聚己內酯(poly-ε-caprolactone，PCL)來構筑膠束的內核，因為PCL的藥物通透性好，兼具可生物降解性，所以主要用作控釋載體，用于藥物的控制釋放。葉酸(Folic?acid，FA)受體是一種與糖基化磷脂酰肌醇(glycosylp-hosphatidylinositol，GPI)連接的膜糖蛋白，對葉酸有高度親合性。葉酸通過γ-羧基偶聯其它小分子化合物如抗腫瘤藥物后，仍能保持與葉酸受體的高親合性。此外，葉酸分子具有分子量小、無免疫源性、無毒、生物相容性好等特點。自從發現葉酸受體在絕大多數惡性腫瘤細胞表面有大量表達以來，基于葉酸受體表達的組織分布特點、葉酸受體與葉酸的高度親和性以及葉酸受體介導的細胞內吞轉運機制，葉酸靶向的腫瘤顯像技術和藥物控釋日漸成為關注的焦點。葉酸-藥物偶聯物與腫瘤細胞表面的葉酸受體特異性結合后，通過內吞作用(endocytosis)進入腫瘤細胞。在細胞內的弱酸性環境(pH?5)中，葉酸受體構型發生改變，釋出葉酸-藥物偶聯物，而受體又可回到細胞膜表面，再轉運其它的葉酸分子或葉酸-藥物偶聯物。

紫杉醇是廣譜抗癌藥物，對卵巢癌、乳腺癌、食管癌等上皮組織腫瘤療效甚佳，但紫杉醇在水中的溶解性很差。為了改善紫杉醇的水溶性，臨床應用的紫杉醇注射液中加入的成分容易導致過敏反應和毒性反應，嚴重限制了紫杉醇的臨床使用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種集診斷和治療于一體的納米聚合物膠束載體的制備方法，克服現有技術中疏水性抗腫瘤藥物使用過程中容易導致過敏反應和毒性反應，嚴重限制了臨床使用的缺陷。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種集診斷和治療于一體的納米聚合物膠束載體的制備方法，包括以下步驟：

步驟(1)將0.1～1重量份疏水性抗腫瘤藥物、1～10重量份的磁共振敏感分子探針、4～40重量份甲氧基封端的聚乙二醇-聚己內酯、0.8～8重量份的帶有主動靶向集團的聚合物膠束及0.8～8重量份FITC-PEG-PCL溶解在1～100重量份四氫呋喃中制成混合物；

步驟(2)將步驟(1)制備的混合物加入到5～800重量份去離子水中，經過透析揮發以去除有機溶劑，得到靶向FA-NP/SPIO/PTX納米聚合物膠束；