[發明專利]一種苯酞類化合物的液-質聯用檢測方法

有效

• 申請號: 201410836714.6
• 申請日: 2014-12-23
• 公開（公告）號: CN105301121B
• 公開（公告）日: 2018-07-03
• 發明（設計）人: 孫艷;李川;李秀雪;姜蓉嶸;李美娟;李利;牛巍;楊軍令;程晨;張納婷;姚小青
• 申請（專利權）人: 天津紅日藥業股份有限公司;中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 北京金信知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 朱梅;李維盈

本發明公開了一種苯酞類化合物的液?質聯用檢測方法。該方法包括在高效液相色譜儀的流動相中加入一定量的含鋰離子的有機化合物，使苯酞類化合物在電離后能夠形成加鋰的準分子離子峰，繼而在給予一定能量下能被打碎產生特征性的碎片離子，通過檢測準分子離子峰→子離子的離子通道實現高靈敏度的二級質譜檢測。本發明可用于檢測預處理后的生物樣品或中藥制劑樣品中的苯酞類化合物，從而實現基于液?質聯用技術的靈敏、特異、準確的分析。

技術領域

本發明涉及一種液-質聯用檢測方法，特別涉及一種苯酞類化合物的液-質聯用檢測方法。

背景技術

川芎和當歸同為傘形科植物，分屬藁本屬和當歸屬。苯酞類化合物，如洋川芎內酯I和H等是常用中藥川芎和當歸的主要藥效成分，為傘形科植物的特征性成分之一。苯酞類化合物對離體血液灌流的動物有明顯的強心、擴張血管、增加冠脈血流量和末梢血管的流量等作用。洋川芎內酯I等能明顯地抑制大鼠腦切片上谷氨酸遞質的釋放，提示該類成分有可能成為治療驚厥、中樞神經損傷、中風等疾病的藥物。此外，苯酞類化合物還對病原性真菌有抑制作用，鎮靜鎮痛作用，驅蟲、收縮子宮平滑肌及抗腫瘤作用。

在現有技術中，中藥及制劑中苯酞類化合物的定量分析方法研究常用高效液相色譜法分離目標化合物后在紫外檢測器進行定量，也有采用氣相色譜法對苯酞類化合物進行定性和定量分析。但由于氣相色譜不能分析在高溫下不穩定的化合物，且有些樣品前處理較復雜，所以限制了此方法在該類化合物定量分析中的應用。

近年來隨著現代分析技術的發展，三重四級桿質譜儀以及飛行時間質譜儀等也越來越多地應用到天然藥物復雜體系中，成為中藥有效成分快速分離和鑒定的有力手段。Chen L等報道(Chen L,Qi J,Chang YX,Zhu D,Yu B(2009)Identification anddetermination of the major constituents in Traditional Chinese Medicinalformula Danggui-Shaoyao-San by HPLC-DAD-ESI-MS/MS.J Pharm Biomed Anal.,50:127-137)苯酞類化合物的質譜檢測也采用液-質譜聯用儀對川芎藥材及其中藥制劑中的有效成分進行分離和鑒定。并且對該類化合物在動物體內的入血成分及代謝物進行篩查和鑒定也有所報道。另外，現有技術中也有采用UPLC-QTOF法對中藥制劑中的洋川芎內酯I等成分進行定量分析。

然而，針對復雜生物樣品中苯酞類化合物的定性、定量分析方法，目前的研究十分有限，現有技術中采用高效液相色譜-紫外檢測法(HPLC-UV)，但其靈敏度有限。He C等(HeC,Wang S,Feng Y,Liang S,Lin X,Xu DS,Ruan KF(2012)Pharmacokinetics,tissuedistribution and metabolism of senkyunolide I,a major bioactive component inLigusticum chuanxiong Hort.(Umbelliferae).J Ethnopharmacol.,142:706-713)也采用HPLC-UV法測定SD大鼠靜脈或口服洋川芎內酯I后體內暴露情況，血漿中洋川芎內酯I的定量下限為50ng/mL；Wang Y等(Wang Y,Hong Y,Feng Y,Xu D,Liang S,Lin X,Shen L(2012)Comparative pharmacokinetics of senkyunolide I in a rat model ofmigraine versus normal controls.Eur J Drug Metab Pharmacokinet.,37:91-97)報道了采用HPLC-UV法測定普通和偏頭痛大鼠血漿中洋川芎內酯I的濃度，其定量下限也為50ng/mL。這些研究中洋川芎內酯I劑量范圍均較高：靜脈給藥約20mg/kg,灌胃給藥約4-652mg/kg。