[發(fā)明專利]一種鑒定豬耳面積大小的方法及其專用試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410834465.7 | 申請日： | 2014-12-26 |
| 公開（公告）號： | CN104561293A | 公開（公告）日： | 2015-04-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王立賢;王紅衛(wèi);張龍超;梁晶 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所;北京黑六牧業(yè)科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢;陳曉慶 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 鑒定 面積 大小 方法 及其 專用 試劑盒 | ||
1.一種鑒定或輔助鑒定豬的耳面積大小的方法，包括如下步驟：檢測待測豬的基因型，根據(jù)所述豬的基因型確定豬耳面積大小：純合AA基因型的豬的耳面積大于純合CC基因型的豬的耳面積；
所述純合AA基因型的豬為g.942A>C多態(tài)性位點的堿基均為A的豬；
所述純合CC基因型的豬為g.942A>C多態(tài)性位點的堿基均為C的豬；
所述g.942A>C多態(tài)性位點為GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的自5’末端起第942位；
所述GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的更新日為2013年9月29日。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述純合AA基因型或所述純合CC基因型的判定方法為如下(1)-(3)任一所示：
(1)以待測豬的基因組DNA為模板，以SEQ?ID?No.1所示的DNA分子和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子為引物進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物；如果所述PCR擴增產(chǎn)物自5’末端起第68位的堿基均為A，則所述豬的基因型為純合AA基因型，如果所述PCR擴增產(chǎn)物自5’末端起第68位的堿基均為C，則所述豬的基因型為純合CC基因型；
(2)以待測豬的基因組DNA為模板，以SEQ?ID?No.1所示的DNA分子和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子為引物進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物；再以所述PCR擴增產(chǎn)物為模板，以SEQ?ID?No.3所示的DNA分子作為單堿基延伸引物，得到單堿基延伸產(chǎn)物；如果所述單堿基延伸產(chǎn)物均為SEQ?ID?No.6所示的DNA分子，則所述豬的基因型為純合AA基因型，如果所述單堿基延伸產(chǎn)物均為SEQ?ID?No.7所示的DNA分子，則所述豬的基因型為純合CC基因型；
(3)以待測豬的基因組DNA為模板，以SEQ?ID?No.1所示的DNA分子和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子為引物進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物；再以所述PCR擴增產(chǎn)物為模板，以SEQ?ID?No.3所示的DNA分子作為單堿基延伸引物，得到單堿基延伸產(chǎn)物；將所述單堿基延伸產(chǎn)物進行基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜分析，如果所述單堿基延伸產(chǎn)物僅為質(zhì)量是4751Da的DNA分子，則所述豬的基因型為純合AA基因型，如果所述單堿基延伸產(chǎn)物僅為質(zhì)量是4711.1Da的DNA分子，則所述豬的基因型為純合CC基因型。
3.一種選育耳面積大或耳面積小的豬的方法，包括選擇純合AA基因型的豬進行選育育成耳面積大的豬，或選擇純合CC基因型的豬進行選育育成耳面積小的豬；
所述純合AA基因型的豬為g.942A>C多態(tài)性位點的堿基均為A的豬；
所述純合CC基因型的豬為g.942A>C多態(tài)性位點的堿基均為C的豬；
所述g.942A>C多態(tài)性位點為GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的自5’末端起第942位；
所述GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的更新日為2013年9月29日。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于：所述純合AA基因型或所述純合CC基因型的判定方法為權(quán)利要求2所述的方法。
5.一種擴增含有g(shù).942A>C多態(tài)性位點的DNA片段的引物對；
所述g.942A>C多態(tài)性位點為GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的自5’末端起第942位；
所述GenBank?Accession?Number為NC_010447.4的序列的更新日為2013年9月29日。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的引物對，其特征在于：所述引物對由SEQ?ID?No.1所示的DNA分子和SEQ?ID?No.2所示的DNA分子組成。
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