[發(fā)明專(zhuān)利]一種基于香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410754223.7
• 申請(qǐng)日: 2015-08-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104498370A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 常盛杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 常盛杰
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/14
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 董建林

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種基于香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法。

背景技術(shù)

母種系指由孢子、子實(shí)體組織、菇木或基質(zhì)菌絲分離純化，并在試管培養(yǎng)基上繁殖的菌絲體。用于培育母種的培養(yǎng)基稱(chēng)為母種培養(yǎng)基。一般常用的母種培養(yǎng)基的配方有：PDA培養(yǎng)基、PDY培養(yǎng)基、木屑培養(yǎng)基、麥粒培養(yǎng)基等，其中應(yīng)用最廣的是PDA培養(yǎng)基。

大多數(shù)的香菇母種的PDA培養(yǎng)基適合培育母種用，但不能保藏菌種。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供一種基于香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法，工藝簡(jiǎn)單，可用于保藏菌種。

為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種基于香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法，其特征在于，包括如下步驟：

S01：將馬鈴薯去皮洗凈，切成片狀放入鋁鍋中，加入清水煮沸，文火維持30-35分鐘，過(guò)濾取汁；

S02：將瓊脂放入水中浸泡后加入馬鈴薯汁液中，繼續(xù)加熱至全部融化，在加熱過(guò)程中，使用玻璃棒攪拌；

S03：加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1，并使用熱水補(bǔ)足溶液到設(shè)定的容積；

S04：測(cè)定并調(diào)節(jié)pH值，使得pH值的范圍為5.5-6；

S05：將配制好的培養(yǎng)基分裝入試管中，分裝完畢后塞上棉塞；

S06：把試管放入高壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌；

S07：降溫后，將培養(yǎng)基擺成斜面，繼續(xù)冷卻凝固后，即制得斜面培養(yǎng)基。

本發(fā)明的有益效果是：工藝簡(jiǎn)單實(shí)用，效果很好，可用于保藏菌種。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以更好的理解本發(fā)明并能予以實(shí)施，但所舉實(shí)施例不作為對(duì)本發(fā)明的限定。

一種基于香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法，包括如下步驟：

S01：將馬鈴薯去皮洗凈，切成片狀放入鋁鍋中，加入清水煮沸，文火維持30-35分鐘，過(guò)濾取汁；

S02：將瓊脂放入水中浸泡后加入馬鈴薯汁液中，繼續(xù)加熱至全部融化，在加熱過(guò)程中，使用玻璃棒攪拌，防止沉鍋底燒焦或溢出；

S03：加入葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1，并使用熱水補(bǔ)足溶液到設(shè)定的容積。一般而言，假設(shè)設(shè)定的容積是1000毫升，那么各組分的重量如下：

馬鈴薯的重量約是200g，葡萄糖的重量約是20g，瓊脂的重量約是18-20g，葡萄糖的重量約是20g，磷酸二氫鉀的重量約是2g，硫酸鎂的重量約是0.5g，維生素B1的重量約是10毫克。

S04：測(cè)定并調(diào)節(jié)pH值，使得pH值的范圍為5.5-6，比如，可以使用5%鹽酸或5%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值。

S05：將配制好的培養(yǎng)基分裝入試管中，分裝完畢后塞上棉塞；

分裝試管時(shí)，要盡量避免培養(yǎng)基粘附管口、瓶口，如果不慎培養(yǎng)基粘著管、瓶口或管壁，一定要用紗布擦凈，以免培養(yǎng)基粘住棉塞而影響接種，或增加雜菌污染機(jī)率。試管裝量根據(jù)需要而定，若制斜面培養(yǎng)基，裝量一般為試管高度的1/5～1/4。

塞入試管的棉塞要緊貼管壁，不能留有縫隙。過(guò)緊妨礙空氣流通，也不便操作；過(guò)松則達(dá)不到過(guò)濾雜菌目的，且棉塞易掉入試管或脫離試管口。松緊度以提起棉塞后試管跟著被提起而不脫落，拔出棉塞可聽(tīng)到輕微的聲音為適宜。標(biāo)準(zhǔn)棉塞應(yīng)是塞頭略大，不易變形，入管部分占棉塞總長(zhǎng)2/3，露在管外部1/3（不少于l厘米）。近年來(lái)，有條件的地方開(kāi)始使用透氣性硅膠塞塞試管口，簡(jiǎn)單實(shí)用，效果很好。

S06：把試管放入高壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌，一般是在0.15-0.16兆帕壓力下滅菌20-30分鐘。

S07：降溫后（降溫至60-65℃時(shí)，以防冷凝水積聚過(guò)多），將培養(yǎng)基擺成斜面，繼續(xù)冷卻凝固后，即制得斜面培養(yǎng)基。需要注意，將試管傾斜時(shí)，保證斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管總長(zhǎng)度的1/2。

在步驟S06中，可以使用兩種方案進(jìn)行滅菌：

第一種，將試管蓋上油紙或牛皮紙并使用繩扎好，豎直放入高壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。

第二種，使用繩子將試管扎成若干捆，棉塞部分用牛皮紙包扎好，豎直放入高壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌。

上述香菇母種的培養(yǎng)基的制作方法工藝簡(jiǎn)單實(shí)用，效果很好，可用于保藏菌種。

以上僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非因此限制本發(fā)明的專(zhuān)利范圍，凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書(shū)內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或者等效流程變換，或者直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)的技術(shù)領(lǐng)域，均同理包括在本發(fā)明的專(zhuān)利保護(hù)范圍內(nèi)。