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[發(fā)明專利]一種采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法在審

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201410750815.1 申請(qǐng)日: 2014-12-10
公開(kāi)(公告)號(hào): CN104432321A 公開(kāi)(公告)日: 2015-03-25
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 阮子琦;張哲滔;吳淵;莫凡 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 杭州元佩特生物科技有限公司
主分類號(hào): A23L2/02 分類號(hào): A23L2/02;C12N15/03;C12N15/01;C12R1/07;C12R1/245
代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224 代理人: 胡紅娟
地址: 310052 浙江省杭州市*** 國(guó)省代碼: 浙江;33
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 采用 發(fā)酵 方式 制作 食療 荔枝汁 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)、將產(chǎn)納豆激酶兼吡咯喹啉醌的納豆芽孢桿菌10261和納豆芽孢桿菌10263分別進(jìn)行亞硝基胍誘變;然后混合二者誘變后代,進(jìn)行細(xì)胞融合傳代培養(yǎng),高通量篩選得到高產(chǎn)納豆激酶兼吡咯喹啉醌的納豆芽孢桿菌,命名為納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510;

2)、將干酪乳桿菌進(jìn)行亞硝基胍誘變,從中篩選出甲硫氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型的干酪乳桿菌,命名為干酪乳桿菌LcS-Met-

3)將納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510和干酪乳桿菌LcS-Met-共發(fā)酵荔枝汁,得到富含納豆激酶和吡咯喹啉醌的荔枝汁。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟1)中,所述的高通量篩選具體包括:①制備2個(gè)平板豆芽汁荔枝汁固體培養(yǎng)基,其中一個(gè)將小鼠抗PQQ?IgG單抗PQQ-mAb配入,形成平板A,另一個(gè)將瓊脂糖-纖維蛋白配入,形成平板B;②將納豆芽孢桿菌10261和納豆芽孢桿菌10263的誘變?nèi)诤虾蟠坎计渲幸粋€(gè)平板后,再用纖維素膜影印至另一個(gè)平板,使平板A和平板B互為影印平板;③平板A中,高產(chǎn)吡咯喹啉醌的誘變?nèi)诤虾蟠渲車纬扇庋劭梢?jiàn)沉淀圈,根據(jù)沉淀圈直徑大小可肉眼判斷產(chǎn)吡咯喹啉醌量大?。虎芷桨錌中,高產(chǎn)納豆激酶的誘變?nèi)诤虾蟠渲車纬赏该魅?,根?jù)透明圈直徑大小可肉眼判斷產(chǎn)納豆激酶活力高低;⑤平板A與平板B中,高產(chǎn)吡咯喹啉醌菌落與高產(chǎn)納豆激酶菌落處于同一位置者,即為高產(chǎn)納豆激酶兼吡咯喹啉醌的納豆芽孢桿菌。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟1)中,所述的平板豆芽汁荔枝汁固體培養(yǎng)基以1L計(jì),由以下量的組分組成:

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟2)中,所述的從中篩選出甲硫氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型的干酪乳桿菌,具體包括:①制備2個(gè)平板MRS固體培養(yǎng)基,其中一個(gè)將甲硫氨酸配入,為平板C,另一個(gè)為單純MRS固體培養(yǎng)基平板,為平板D;②將誘變后的干酪乳桿菌涂布其中一個(gè)平板后,再用纖維素膜影印至另一個(gè)平板,使平板C和平板D互為影印平板;③在平板C與平板D的同一位置,平板C出現(xiàn)菌落而平板D未出現(xiàn)菌落,或平板C上的菌落顯著大于平板D上的菌落,則該菌落為甲硫氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型干酪乳桿菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟2)中,所述的平板MRS固體培養(yǎng)基以1L計(jì),由以下量的組分組成:

該MRS固體培養(yǎng)基的pH值保持在6.2~6.4。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟3)中,在共發(fā)酵之前,將納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510和干酪乳桿菌LcS-Met-分別進(jìn)行活化培養(yǎng),納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510在豆芽汁荔枝汁液體培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為34~36℃,干酪乳桿菌LcS-Met-在MRS液體培養(yǎng)基中進(jìn)行活化培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為36~38℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟3)中,所述的豆芽汁荔枝汁液體培養(yǎng)基以1L計(jì),由以下量的組分組成:

荔枝汁???????????100~150mL;

蔗糖??????????????4.0~6.0g;

豆芽汁?????????????????余量;

所述的MRS液體培養(yǎng)基以1L計(jì),由以下量的組分組成:

該MRS液體培養(yǎng)基的pH值保持在6.2~6.4。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用發(fā)酵方式制作食療荔枝汁的方法,其特征在于,步驟3)中,將納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510和干酪乳桿菌LcS-Met-共發(fā)酵荔枝汁,具體包括:將活化后的納豆芽孢桿菌BN-NKPQQ-RWX-510和干酪乳桿菌LcS-Met-混合,形成混合菌液,將混合菌液接種至含荔枝汁的發(fā)酵培養(yǎng)基,紗布封口培養(yǎng)后得到富含納豆激酶和吡咯喹啉醌的荔枝汁。

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