[發明專利]一種高效降解蠅蛆蛋白的蘇云金芽孢桿菌菌株

在審

• 申請號: 201410729336.1
• 申請日: 2014-12-04
• 公開（公告）號: CN104450571A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 李立恒;方俊;符晨星;謝文玉
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/00;A23K1/16;C12R1/07
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所 43008
• 代理人: 江巨鰲

技術領域

本發明涉及一種蠅蛆蛋白高效降解菌，屬于農業微生物技術領域，是利用微生物發酵的方法降解蠅蛆蛋白，適用于優質蛋白飼料的生產。

背景技術

近年來，隨著我國飼料工業的迅猛發展，蛋白質飼料的原料短缺問題已嚴重地限制了我國飼料工業的發展。目前，我國主要靠進口魚粉以解決蛋白質資源的不足的問題，所以開發新的蛋白質資源成為科學研究的熱點課題。大豆是優質的蛋白原料，但其偏高的價格無疑將限制飼料工業的發展。因此，盡快開發、尋求與推廣新型的、安全的蛋白飼料原料是當前的首要任務。家蠅是全世界各地區最為常見的一種昆蟲，其數量巨，繁殖能力強，繁殖速度快。蠅蛆是家蠅的幼蟲形態，含有多種脂肪酸、氨基酸、維生素與礦物質。在我國蠅蛆可以進行繁殖，具有較高的蛋白質含量，是可以進行開發的。目前已制成了蠅蛆蛋白粉。蠅蛆中蛋白質含量約為60.53％，氨基酸種類齊全，且含人體所需的8種必需氨基酸以及組氨酸，其必需氨基酸含量占氨基酸總量的42.14％，完全超過了FAO/WHO建議的優良蛋白質必需氨基酸應占氨基酸總量40％的標準。蠅蛆蛋白與其它優質動物蛋白相比較毫不遜色，其營養價值甚至還要高于其它的動物蛋白，因此它更是一種優質的蛋白資源。但蠅蛆蛋白如果直接飼喂，卻存在蠅蛆蛋白營養利用低下的問題，而蠅蛆蛋白質在水解出寡肽，多肽和氨基酸的混合物后，能提高飼料的營養價值，有利于動物的吸收；當然可以采用酶法進行降解，但成本高，而且所購蛋白酶活力低，水解程度小，如果采用蠅蛆蛋白降解菌株，既可節約成本，又能提高水解程度。目前國內研究較少，是蠅蛆蛋白飼料的發展方向。

發明內容

本發明的目的是提供一種蠅蛆蛋白高效降解菌株，用于蠅蛆蛋白的降解，從而開發一種新的有用的蛋白質資源，解決目前蠅蛆蛋白營養利用低下的問題。

本發明提供一種高效降解蠅蛆蛋白的蘇云金芽孢桿菌菌株，菌株分類命名為血清變異型蘇云金芽孢桿菌(Bacillus?thuringiensis?serovar?thuringiensis)，2014年10月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC?NO.9789。主要生物學特性為，菌落形態為圓形，乳白色，表面濕潤，為典型的細菌形態，經革蘭氏染色染色法和芽孢染色法鑒定，該菌株為革蘭氏陰性芽孢桿菌。經基因測序鑒定為血清變異型性蘇云金芽孢桿菌。該菌株Sep-7S?ribosomal?RNA?gene登錄號為KF228911。

蠅蛆蛋白降解菌株能在蠅蛆蛋白粉培養基上生長產生透明水解圈，其培養基配方為：100mL蒸餾水中含2.0g蠅蛆蛋白粉，0.5g氯化鈉，2.0g瓊脂粉，加熱溶解，調節PH值7.0，121℃高壓滅菌30min。所述的蠅蛆蛋白粉是將蠅蛆烘干后，進行粉碎而成，過100目篩。

上述菌株KF228911的擴大培養方法為：

(1)種子培養基的配方為：1L蒸餾水中含：3g牛肉膏，10g蛋白胨，5g氯化鈉，加熱溶解，調節PH值7.0，121℃高壓滅菌30min。

(2)將所述的菌株KF228911接種于裝有100mL種子培養基的250mL的錐形瓶中，溫度30℃條件下，在搖床上以150r/min的轉速培養24小時，獲得菌懸液，菌液數量為4×10¹⁰CFU/ml。

蠅蛆蛋白降解菌發酵培養基配方為：1L蒸餾水中含：20g蠅蛆蛋白粉，20g葡萄糖，5g氯化鈉，調節PH值7.0，121℃高壓滅菌30min。

用蠅蛆蛋白降解菌KF228911菌懸液以5％的接種量進行接種，在發酵后，可以對蠅蛆蛋白進行降解，培養溫度30℃，150r/min培養48小時，在完成培養后對發酵液4000r/min進行離心20分鐘，收集上清液，可產生可溶性氨基酸含量為1.744mg/mL。

有益效果

本發明提供了高效降解蠅蛆蛋白的蘇云金芽孢桿菌菌株KF228911。蠅蛆蛋白降解菌能在蠅蛆蛋白粉培養基上生長，產生透明水解圈。提供了蠅蛆蛋白降解菌KF228911的擴大培養方法。用蠅蛆蛋白降解菌株培養蠅蛆蛋白發酵培養基，發酵液中蠅蛆蛋白降解產生的氨基酸含量為1.744mg/mL。蠅蛆蛋白飼料如接種蠅蛆蛋白降解菌KF228911可提高其可溶性氨基酸的含量，提高蠅蛆蛋白作為飼料的營養價值，具有廣闊的發展前景。