[發明專利]一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法

有效

• 申請號: 201410726096.X
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104502470A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 潘仙華;張瑞敏;于一文;徐斯堯;陳思羽;劉烽;徐娜
• 申請（專利權）人: 上海應用技術學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 吳寶根;馬文峰

技術領域

本發明涉及一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法，即將R/S-3-奎寧環醇柱前衍生得到具有紫外吸收的衍生物，再對衍生物進行手性色譜柱和紫外檢測器拆分檢測。

背景技術

R-3-奎寧環醇的化學名是1-氮雜環-[2,2,2]-辛-R-3-醇，是研究人類血紅球乙酰膽堿酯酶，合成幾種蕈毒堿受體拮抗劑類藥物如索利那新、瑞伐托酯、他沙利定等的重要中間體。同時也是手性液體催化劑的前體，被廣泛應用于手性催化。目前，大多數藥物以外消旋體給藥為主，而以光學純的對映體給藥是大多數手性藥物的發展趨勢。因此，對R/S-3-奎寧環醇手性分離方法研究有著重要的醫學研究價值和工業價值。

目前，對R/S-3-奎寧環醇的手性拆分方法研究并不多，主要有化學拆分法和色譜拆分法。經文獻檢索，主要是化學拆分法。這是因為R/S-3-奎寧環醇沒有紫外吸收，不適用于常規的液相分析法檢測；而且由于其手性中心缺乏能與手性色譜柱填料產生氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用或空間作用的基團，難以進行手性色譜法分離。

李書彬等較早的報道了用化學拆分法R/S-3-奎寧環醇，主要是用R/S-3-奎寧環醇與D-(+)-二苯甲酰酒石酸在醇和酮的混合溶劑中拆分，最后水解得到R-3-奎寧環醇。該方法操作繁瑣、周期長、收率低，導致工業化難度大、成本高。王東武等發明了用AD-H手性色譜柱測定R/S-3-奎寧環醇的光學純度的方法，但是其分離度不高，且色譜峰峰型對稱性不高，嚴重拖尾。

發明內容

本發明的目的為了解決上述的操作繁瑣、周期長、成本高、靈敏度低、色譜峰分離度和對稱性低等技術問題而提供一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法，該方法可以克服現有分析方法的缺陷和不足，使得操作簡單便捷、檢測快速靈敏、色譜峰峰型和對稱性好、分離度高，可更為有效地檢測和拆分?R/S-3-奎寧環醇。

本發明的技術方案

一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法，具體包括如下步驟：

（1）、將R/S-3-奎寧環醇經過柱前衍生酯化反應得到R/S-3-奎寧環?醇酯，所得的R/S-3-奎寧環醇酯，其結構式如下：

其中R為COC₆H₅，SO₂C₆H₄CH₃，COC₁₀H₇或COC₆H₄OCH₃；

所述的柱前衍生酯化反應即將R/S-3-奎寧環醇與芳香酸在乙酸乙酯溶劑中，二甲基甲酰胺（以下簡稱DMF）作催化劑，進行酯化反應，得到R/S-3-奎寧環醇酯；

上述酯化反應所用的芳香酸、R/S-3-奎寧環醇和催化劑的量，按摩爾比計算，即芳香酸：R/S-3-奎寧環醇：DMF為1:1:0.1；

其中所述的芳香酸為苯甲酸、對甲基苯磺酸、1-萘甲酸或對甲氧基苯甲酸；

（2）、利用高效液相色譜儀，以直鏈淀粉類手性柱為色譜柱，用由正己烷、醇和堿性添加劑組成的混合液作為正相流動相，將上述的R/S-3-奎寧環醇酯配成濃度為1.0mg/mL的樣品溶液，控制流速為0.6-1mL/min，進樣量為5μL，檢測波長為220-280nm，色譜柱柱溫為20-35℃，將上述得到的R/S-3-奎寧環醇酯進行手性分離；

所述的由正己烷、醇和堿性添加劑組成的混合液，其中所述的醇為乙醇或異丙醇；所述的堿性添加劑為二乙胺或乙醇胺；

所述的由正己烷、醇和堿性添加劑組成的混合液中，按體積比計算，即正己烷：醇：堿性添加劑為59.6-89.6%：10-40%：0.1-0.4%;

所述的直鏈淀粉類手性柱是以直鏈淀粉-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）鍵合在5μm硅膠表面作為手性固定相的Chiralpak?IA?250*4.6mm手性柱。

本發明的有益效果

本發明的一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法，由于R/S-3-奎寧環醇與芳香酸進行衍生反應獲得的衍生物具有紫外吸收，可以使用紫外檢測器檢測，適用性更廣。

進一步，本發明的一種利用柱前衍生高效液相色譜法拆分R/S-3-奎寧環醇的方法，由于使用由正己烷、醇和堿性添加劑組成的混合液作為流動相使得分離度均大于10，達到完全的基線分離；采用的堿性添加劑二乙胺或乙醇胺能有效的改善峰型，達到更好的分離度效果。