[發明專利]一種蠅防御素突變體及其制備方法和用途有效
| 申請號： | 201410712363.8 | 申請日： | 2014-11-28 |
| 公開（公告）號： | CN104404049A | 公開（公告）日： | 2015-03-11 |
| 發明（設計）人： | 李鋼;鄒輝琴;高靜雷;溫靜 | 申請（專利權）人： | 四川華德生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/12 | 分類號： | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/435;C12P21/02;A23K1/17;A61K38/17;A61P31/00 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 610041 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 防御 突變體 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種如SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列。
2.一種重組載體，其特征在于：包含SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列。
3.根據權利要求2所述的重組載體，其特征在于：所述的重組載體是重組pGEX-4-1質粒。
4.一種重組菌，其特征在于：它包含權利要求2或者3所述的重組載體。
5.根據權利要求4所述的重組菌，其特征在于：所述的重組菌為重組大腸桿菌。
6.一種蠅防御素突變體，其特征在于：它由SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列編碼。
7.根據權利要求6所述的蠅防御素突變體，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：4所示。
8.一種制備權利要求6或7所述蠅防御素突變體的方法，其特征在于：包含如下步驟：
(1)取權利要求4或5所述的重組菌，接種于含有50ug/mL氨芐青霉素的液體肉湯培養基中，37℃、220rpm震蕩培養12h，用含有50ug/mL的氨芐青霉素的液體肉湯培養基重懸至OD600為0.1，于37℃培養至OD600為0.8，然后加入IPTG至終濃度為1mM，誘導表達3小時，離心，得菌體；
(2)取菌體，用GST融合蛋白純化試劑盒分離純化，得到結合了GST融合蛋白的樹脂后，加入等體積的濃度為50U/ml的凝血酶溶液，混勻，室溫震蕩10小時，離心，得上清，去除凝血酶，即得。
9.權利要求6或7所述蠅防御素突變體在制備飼料添加劑或抗菌藥物中的用途。
10.一種抗菌藥物，其特征在于：它是以權利要求6或7所述蠅防御素突變體為活性成分，加上藥學上可接受的輔料制備而成的制劑。
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