[發明專利]一種膜法提取A環降解物的方法

在審

• 申請號: 201410706525.7
• 申請日: 2014-11-28
• 公開（公告）號: CN104496958A
• 公開（公告）日: 2015-04-08
• 發明（設計）人: 應正平;蔣青鋒;陳小良;蔣華容
• 申請（專利權）人: 江西贛亮醫藥原料有限公司
• 主分類號: C07D311/94
• 分類號: C07D311/94;C12P17/06
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及一種A環降解物的提取方法，尤其涉及一種膜法提取A環降解物的方法。

背景技術

近代，有關使用微生物法轉化植物甾醇制備甾體中間體的研究成果被廣泛報道和研究，相關報道最早可追溯到1937年，Mamoli和Vercellone在他們發表的兩篇專利Ber.70470和Ber.702079中，公開了通過酵母發酵將17-酮-類固醇還原成17-β-羥類固醇。此后，peterson和Murray在美國專利N0.2602769中公開一種用根霉屬真菌產生孕酮的11-a-羥化方法。1972年，Kraychy等在美國專利N0.3684657中公開了用Mycobacterium?SP.NRRL?B-3683降解17位脂肪鏈制備4-AD，ADD的方法。1973年，Marsheck等在美國專利N0.3759791中公開了用Mycobacterium?SP.NRRL?B-3805，以膽甾烷等17位有8個以上碳原子的甾體原料制備4-AD。

A環降解物(δ-Lactone)，是合成雌酚酮和雌二醇及其衍生物的重要中間體，但轉化過程中甾核A環、B環開環，非常容易降解，產品難以積累，從而難以達到產業化標準。申請號為201410029845.3的中國專利申請公開了一種偶發分枝桿菌及在發酵生產δ-內酯中的應用，但發酵轉化中用到大豆油，提取困難，且環境影響大。

發明內容

為解決現在技術所存在的問題，本發明提供一種利用膜集成技術提取A環降解物的方法，可以有效的解決目前A環降解物的提取純化問題，對A環降解物的生產提供更有效的提取方法。

本發明采用如下技術方案實現：一種膜法提取A環降解物的方法，包括如下步驟：

A)用發酵法制備A環降解物，得到含有A環降解物的發酵液，靜置分層，將兩相料液分離；

B)將水相料液用堿調節PH值至工藝值，然后經超濾膜過濾處理，去除絕大部分的菌絲體和大分子雜質，滲透側是超濾膜凈化液；

C)將超濾膜凈化液送入納濾膜中進行濃縮，由截留側得到納濾膜濃縮液；

D)將濃縮液用酸調節PH值至工藝值，然后用氯仿萃取，靜置分層，得氯仿層；

E)濃縮氯仿，加入甲苯打漿，結晶沉淀、離心、烘干后，得到A環降解物干粉。

優選地，所述超濾膜的材質是聚醚砜、聚砜、聚丙烯腈。

優選地，所述超濾膜過濾時，操作壓力為0.8～1.0MPa，膜面流速為2～4m/s。

優選地，所述超濾膜的截留分子量為10000～20000道爾頓。

優選地，步驟B中，將水相料液用堿調節PH值至11～14。

優選地，所述納濾膜的材質是聚醚砜、聚砜、聚丙烯腈。

優選地，所述納濾膜濃縮時，操作壓力為0.8～1.0MPa，循環流量為2～3m³/h。

優選地，所述納濾膜的截留分子量為100～200道爾頓。

優選地，步驟C中，將超濾膜凈化液送入納濾膜中進行濃縮的濃縮倍數是5～7倍。

優選地，步驟D中，將濃縮液用酸調節PH值至1～2，所述酸為濃鹽酸或濃硫酸。

步驟A和步驟B是通過發酵法來制得A環降解物，發酵法制備A環降解物，可以采用常見的偶發分枝桿菌來實現這一目的，發酵液也可以根據現有的技術進行選擇。如果按照常規的方法對發酵液直接進行萃取，萃取攪拌的過程中會出現乳化，如果要將乳化物分離掉，就會使產品的收率受到影響，如果過多的將乳化物分到產品中，則會影響產品的純度和含量；而且由于乳化層的存在，使得萃取分層的步驟時間延長，影響生產效率。在本發明的技術方案中，對發酵液水相經超濾膜處理，去除絕大部分的菌絲體和大分子蛋白等雜質。這樣在萃取步驟中由于雜蛋白的減少，就避免了萃取時界面乳化的情況的發生，提高了萃取效率，提高了產率和產物的純度。

與現在技術相比，本發明具有如下有益效果：采用膜集成技術處理發酵液水相，提高了A環降解物的純度和產率；避免了萃取過程中界面乳化的問題；生產工藝簡單，生產周期短，且可連續大規模生產；減少了溶劑的消耗量，降低了生產成本；對最后的萃取工藝能減少提取時間，提高收率及產品品質。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明一種膜法提取A環降解物的方法作進一步的詳細說明。

實施例1