[發明專利]文冠果莖段組織的培育方法有效
| 申請號： | 201410685936.2 | 申請日： | 2014-11-25 |
| 公開（公告）號： | CN104322376A | 公開（公告）日： | 2015-02-04 |
| 發明（設計）人： | 張勇 | 申請（專利權）人： | 張勇 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295 | 代理人： | 黃為 |
| 地址： | 518116 廣東省深圳市龍*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 文冠果 組織 培育 方法 | ||
1.一種文冠果莖段組織的培育方法，其特征在于，依次包括下述步驟：
1)文冠果莖段組織消毒處理
采集文冠果當年生休眠枝條的中、下部莖段，進行修剪，減去病死枝和風干枝，用無菌水清洗干凈，置于廣口瓶中，75％雙氧水點滴葉腋處，再用75％酒精消毒20～40s，沖洗干凈后，再用新潔爾滅消毒30～60s，并用無菌水清洗；
2)初代培養
將消毒后干凈枝條去掉頂端和底端，剪成長4～6cm且帶一個腋芽的莖段斜插入初代培養基中在24～26℃，光培養12/12h，光強1000～1500lux培養15～17天；
其中：
所述的初代培養基是通過下述方法制備：在1/2MS基本培養基中，添加蔗糖20～30g/L，瓊脂5～6g/L，6-芐氨基嘌呤15～25mg/L，谷氨酰胺100～200mg/L定容后，用pH調節劑調節pH至5.3～6.3，滅菌后冷卻凝固待用；
3)繼代培養
將誘導出的不定芽切取，再將取芽后的莖段接入新配置的初代培養基中繼續培養，每隔15～17天取芽一次，重復操作；
4)生根培養
將切取出來不定芽接入生根培養基，在24～26℃，光培養12/12h，光強1000～1500lux培養5～7天；
其中：
所述的生根培養基是通過下述方法制備的：在1/4MS基本培養基中，添加麥芽糖30～90g/L，瓊脂5～6g/L，6～芐氨基嘌呤15～25mg/L，6～糠基氨基嘌呤1.5～2.5mg/L定容后，用pH調節劑調節pH至5.3～6.3，滅菌后，加入茶油100～200mg/L，冷卻凝固待用。
2.如權利要求1所述的文冠果莖段組織的培育方法，其特征在于，所述的pH調節劑為1mol/L的HCl和NaOH。
3.如權利要求1所述的文冠果莖段組織的培育方法，其特征在于，所述的培養基的滅菌方法是在110℃下滅菌20min。
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