[發明專利]異尖線蟲的實時熒光PCR檢測試劑盒及檢測方法有效
| 申請號: | 201410676272.3 | 申請日: | 2014-11-21 |
| 公開(公告)號: | CN104561265A | 公開(公告)日: | 2015-04-29 |
| 發明(設計)人: | 黃達娜;張仁利;陽帆;吳春利;李玥;武偉華;耿藝介;李曉恒;高世同 | 申請(專利權)人: | 深圳市疾病預防控制中心 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 深圳中一專利商標事務所 44237 | 代理人: | 張全文 |
| 地址: | 518000 廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 線蟲 實時 熒光 pcr 檢測 試劑盒 方法 | ||
1.一種異尖線蟲的實時熒光PCR檢測試劑盒,其特征在于,包括PCR特異性引物和熒光探針;其中,
所述PCR特異性引物包括具有序列表SEQ.ID.No.1堿基序列的異尖線蟲核糖體18s上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2堿基序列的異尖線蟲核糖體18s下游引物;
所述熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.3堿基序列,且所述熒光探針5’端標記熒光報告基團、3’端標記熒光淬滅基團。
2.如權利要求1所述的異尖線蟲的實時熒光PCR檢測試劑盒,其特征在于,所述熒光報告基團為FAM。
3.如權利要求1或2所述的異尖線蟲的實時熒光PCR檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括有陽性對照;所述陽性對照為帶有異尖線蟲核糖體18s基因的重組質粒。
4.如權利要求1或2所述的異尖線蟲的實時熒光PCR檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括有陰性對照;所述陰性對照為RNase?free?dH2O。
5.一種異尖線蟲的實時熒光PCR檢測方法,其特征在于,包括如下步驟:
提取待測樣本DNA;
以提取的待測樣本DNA為模板進行實時熒光PCR;其中所述實時熒光PCR過程中采用的引物為具有序列表SEQ.ID.No.1堿基序列的異尖線蟲核糖體18s上游引物和具有序列表SEQ.ID.No.2堿基序列的異尖線蟲核糖體18s下游引物;所述實時熒光PCR過程中采用的熒光探針為具有序列表SEQ.ID.No.3堿基序列的熒光探針,且所述熒光探針5’端標記熒光報告基團、3’端標記熒光淬滅基團;
檢測PCR過程中的熒光信號。
6.如權利要求5所述的異尖線蟲的實時熒光PCR檢測方法,其特征在于,所述熒光報告基團為FAM。
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