[發明專利]一種微生物發酵提取仙草多糖的方法

有效

• 申請號: 201410660013.1
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN104387488A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 周軍;陳悅水
• 申請（專利權）人: 深圳市深寶華城科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 李悅;齊文劍

技術領域

本發明涉及一種微生物發酵提取植物中的多糖的方法，具體涉及一種微生物發酵提取仙草多糖的方法。

背景技術

涼粉草，又名：仙人草、仙人凍、仙草，為唇形科植物，莖下部伏地。仙草多糖是仙草中含有一種具有凝膠性的多糖。仙草多糖由甘露糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖8種單糖組成。

目前對仙草多糖的提取主要有水煮、醇沉等工藝，如專利CN1230356A公開了一種仙草多糖及其制備方法，它是將仙草經選料、粉碎、加Na₂CO₃、加水熬汁，過濾棄渣，將得到的仙草濾液經過活性炭脫色后蒸發濃縮，噴霧干燥制得仙草多糖粉劑。該專利方法仙草多糖的收率低，提取的仙草多糖中將容易摻雜蛋白質，為后期的分離帶來較大困難，若不分離，仙草多糖產品品質差，不易保存。專利CN102911282A提供了一種仙草多糖液的脫色、脫蛋白工藝方法。這方法也是針對通過熬煮方法提取的仙草多糖的提純方式。傳統的醇沉工藝醇耗量較大，收率也比較低。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種生產成本更低、更環保、更高提取率、制品更純的微生物發酵提取仙草中多糖的方法。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種微生物發酵法提取仙草多糖的方法，包括以下步驟：

1)粉碎：將干仙草原料粉碎至20-50目；

2)首次提?。簩⒎鬯楹蟮南刹菅b入發酵罐，加入4-8倍體積的沸騰的純凈水，用磷酸二氫鉀緩沖溶液調pH至4-6，攪拌保溫提取后冷卻；

3)發酵菌種子液的制備：黑曲霉和米曲霉經活化、擴增培養得到混合發酵菌種子液；

4)接種：發酵菌種子液在無菌條件下接種到發酵罐中，攪拌混合均勻；

5)發酵：密封靜置發酵1-3天；

6)二次提?。喊l酵終止后，將發酵后的物料升溫至沸騰，保溫攪拌30min；

7)粗濾和分離：過濾除去200目以下的雜質，離心分離；

8)膜濃縮：采用聚酰胺復合膜過濾，得仙草濃漿；

9)醇沉：向仙草濃漿中添加無水乙醇，攪拌10min后靜置1-2h，冷卻至10-15℃后離心分離，收集沉淀物；

10)干燥：90-100℃干燥至仙草多糖水分含量在5％以下。

作為優選，步驟2)中，提取時間為40-60min，提取后冷卻至28-34℃。

作為優選，步驟3)中，黑曲霉和米曲霉經活化、擴增培養是將黑曲霉、米曲霉在25-28℃條件下，150-200轉/分的搖床上擴增培養18-25小時，得到混合發酵種子液。

作為優選，步驟3)中黑曲霉、米曲霉以2:1的比例進行擴增培養。

作為優選，步驟4)中發酵菌種子液按體積比5-10％的接種量接種至發酵罐中。

作為優選，步驟5)中，發酵的溫度為28-34℃。

作為優選，步驟7)中，采取雙層振動篩，上層為80目篩，下層為200目篩。

作為優選，步驟8)中，聚酰胺復合膜濃縮溫度30-40℃，濃縮時間為60-120min，仙草濃漿出料濃度為15.0±1.0Brix。

作為優選，步驟9)中，添加無水乙醇的體積為仙草濃漿體積的50％-70％。

作為優選，步驟10)中，干燥方式采用真空干燥或熱風干燥。

相比現有技術，本發明的有益效果在于：

1.本發明提取仙草多糖收率高。本發明采用復合微生物發酵提取工藝，采用二次提取工藝，仙草先經沸水保溫提取后再經黑曲霉、米曲霉菌種子液發酵提供，仙草多糖的提取得率比堿提法提高15％，比高壓煮制法提高25％。

2.本發明提取仙草多糖工藝環保。本方法一改以前的長時間熬煮、堿提等傳統提取技術，采用生物提取方式，提取過程低碳環保。仙草漿體經膜濃縮后，醇沉過程乙醇用量大大減少，且可在10-15℃之間醇沉完全，減少了溶劑的排放，降低了能耗。

3.本發明提取仙草多糖的純度高。傳統的熬煮、堿提方式，仙草中有效成分易變性，顏色較深，且提取出來的仙草多糖含有蛋白質雜質，品質較差且不易保存。采用本發明提供的二次提取工藝，蛋白質在發生物發酵階段變性，經離心分離和膜濃縮過程，最后的仙草多糖成品純度高，品質好。

4.本發明提取仙草多糖的口感好。本發明的提取和分離、濃縮都在較溫和的條件下進行，濃縮過程無相變，仙草多糖損耗少，凝膠強度大，質感佳。

下面結合附圖和具體實施方式對本發明作進一步詳細說明。

附圖說明