[發明專利]木脂素類化合物4-酮基松脂素在制備抗乙肝病毒藥物中的用途

在審

• 申請號: 201410658635.0
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN105663110A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 陳道峰;殷翔;史訓龍;朱海燕;盧燕
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: A61K31/34
• 分類號: A61K31/34;A61P31/20
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬于醫藥領域，涉及一種從藥用植物山芝麻中分離得到的木脂素類化 合物4-酮基松脂素在制備抗乙肝病毒藥物中的用途。

背景技術

據有關統計顯示，全世界大約有3億多人為慢性乙肝病毒(HBV)攜帶者， 我國約占半數。乙肝病毒感染已成為全球性的影響人類健康的主要疾病之一，由 于HBV感染可以導致慢性肝炎、肝硬化和原發性肝癌，因此成為影響人類壽命 的九大疾病之一。由于慢性HBV感染者較非攜帶者發生肝癌的相對危險率為 217，因此在全世界每年大約有200萬人死于乙肝引起的肝硬化和肝癌，而我國 又是乙型肝炎的高發區，每年約有25萬人死于與乙肝相關的慢性肝病(肝硬化 與肝癌)。上述疾病給人民健康和國民經濟帶來巨大損失。因此，尋求高效低毒 的抗HBV藥物已成為刻不容緩的問題。

藥物化學工作者在篩選抗HBV藥物的過程中進行了不懈的努力，但到目前 為止能治愈HBV感染的特效藥還在尋找。臨床上已獲得FDA正式批準使用的 α-干擾素和核苷類藥物拉米呋啶只能在某種程度上獲得治療效果，對大多數病人 還達不到治愈的目的，停止治療后的“反跳”現象是醫藥工作者最感棘手的問題， 所以開發研制高效、低毒、不“反跳”的抗HBV新藥向藥物化學工作者提出了挑 戰。在篩選抗HBV新藥的過程中，越來越多的藥物化學工作者把注意力轉向了 植物來源豐富、價廉易得、毒副作用小、分子結構復雜多樣的天然化合物。

山芝麻為梧桐科植物山芝麻(HelicteresangustifoliaL.)的干燥根或全株， 味苦、性寒，歸肺、大腸經，可解表清熱、解毒消腫，用于治療感冒發熱、痄腮、 乳娥、麻疹、咳嗽、泄瀉痢疾、癰腫。藥理研究表明山芝麻具有抗菌、抗炎、抗 病毒及抗腫瘤等活性。我們的研究表明山芝麻粗提物具有很好的抗HBV活性， 但對其抗HBV的藥效物質卻缺乏研究，而本發明涉及的4-酮基松脂素尚未見抗 HBV活性報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種從山芝麻中分離得到的木脂素類化合物4-酮基松 脂素在制備抗乙肝病毒藥物中的用途。

本發明應用現代藥理篩選方法，從梧桐科山芝麻屬(Helicteres)植物山芝麻 (H.angustifolia)中提取分離得到木脂素類化合物4-酮基松脂素，并經試驗證實 其具有抗HBV活性。

本發明所述的活性化合物具有如下的化學結構：

本發明的化合物通過下述方法制備：

取山芝麻干燥地上部分15kg，95％乙醇回流提取，濃縮后分別用石油醚、 乙酸乙酯和正丁醇萃取，共得1.05kg，取乙酸乙酯萃取物160g進行硅膠柱色譜， 以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫，所得流份以不同洗脫劑進行反復硅膠柱色譜、MPLC 和半制備HPLC等分離純化手段分離得到化合物4-酮基松脂素。

本發明的化合物4-酮基松脂素進行了體外抗HBV實驗，結果證實，所述化 合物具有顯著的抗HBV活性，且有效濃度低，其對HBsAg的IC₅₀值為36.6μg/ml， 對HBeAg的IC₅₀值為126.4μg/ml，顯著高于陽性對照拉米呋啶，可作為活性成 分用于制備抗HBV的藥物。

具體實施方式

實施例14-酮基松脂素的提取分離

取山芝麻干燥地上部分15kg，粉碎，用95％乙醇回流提取3次(50L×3)， 每次2h，合并提取液并濃縮得浸膏1.05kg，加水(4L)混懸，分別以等體積石 油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取5次，合并萃取液并濃縮至干，得乙酸乙酯萃取物 160g。將乙酸乙酯萃取部位經硅膠(200-300目)柱色譜分離，依次以二氯甲烷 -甲醇(50:1-0:1)梯度洗脫，得到11個流份(Fr.1-11)，其中流份Fr.3(30g) 再經硅膠柱色譜(二氯甲烷-甲醇，30:1,20:1,10:1,5:1,3:1,1:1)、MPLC(甲醇- 水，20:80-80:20梯度洗脫)和半制備HPLC等手段純化，分離得到化合物4-酮 基松脂素(4-ketopinoresinol,1)。