[發(fā)明專利]一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410651909.3
• 申請日: 2014-11-17
• 公開（公告）號: CN104335902A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發(fā)明（設計）人: 王沛政;馮慧敏;陳友;武耀廷
• 申請（專利權）人: 瓊州學院;王沛政
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于,采用的方法步驟具體如下：

（1）巴西蕉莖尖薄片的EMS誘變：將直接購買的巴西蕉(Musa?AAA?Cavendish?subgroup?CV．Brazil)吸芽在無菌條件下將切好的巴西蕉莖尖2-3mm左右薄片，其中根部薄片棄之，直接泡在含EMS誘變劑中處理30min；

（2）香蕉莖尖薄片的枯萎病粗毒素多輪連續(xù)篩選：經(jīng)EMS突變處理后的巴西蕉莖尖薄片植入到設置的培養(yǎng)基中，在27℃，光照周期12（光照）/12（黑暗）條件下培養(yǎng)30天，誘導出再生植株；將存活的再生植株繼續(xù)切成薄片加有含40μg/ml鐮刀菌酸濃度的香蕉枯萎病粗毒素的上述設置的培養(yǎng)基為選擇壓力誘導再生植株，同樣條件培養(yǎng)，誘導出再生植株再切成薄片以同樣條件連續(xù)篩選誘導7輪，PH至5.8;

所述的設置培養(yǎng)基含MS基本鹽十30g/L蔗糖+6.5g/L瓊脂粉+改良的維生素/氨基酸溶液+4mg/L的6-BA和0.2mg/L的IAA;

（3）再生苗生根：連續(xù)篩選誘導7輪后的無菌苗接入生根培養(yǎng)基，40天后長出完整根系后方可進行煉苗，并最終獲得枯萎病抗性得到顯著提高的香蕉苗植株。

2.如權利要求1所述的一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于,巴西蕉莖尖切好為2-3mm左右薄片，直接泡在含EMS?200mMol/L?濃度的誘變劑中；EMS?200mMol/L濃度配置采用：將EMS原液先用無菌水稀釋，再用0.1mol/L，Ph=5.6的磷酸緩沖液稀釋。

3.如權利要求1所述的一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于，所述的改良的維生素/氨基酸溶液配方：1.19μmol／L的維生素B1，0.97μmol／L的維生素B6，0.13μmol／L?的D-泛酸鈣，1.62μmol／L的煙酸，0.01μmol／L的葉酸，26.64μmol／L的甘氨酸，113.57μmol／L的抗壞血酸，0.07μmol／L的氨基苯酸，56.82μmol／L?的L-半胱氨酸，0.01lμmol／L的核黃素，555.06μmol／L的肌醇，370.94μmol／L的硫酸腺喋呤，551.88μmol／L的酪氨酸。

4.如權利要求1所述的一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于,?所述的香蕉枯萎病菌粗毒素液采用，將香蕉枯萎病4號生理小種（F.oxysporum?f?sp.cubense?4）在查彼氏培養(yǎng)基于（25±2）℃，120r/min的振蕩搖床中培養(yǎng)12d，濾去菌絲后，濾液經(jīng)8000rpm離心20min，取上清液無菌過濾，濾液即為粗毒素液，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

5.如權利要求1所述的一種利用香蕉莖尖薄片提高香蕉植株枯萎病抗性的方法，其特征在于,?所述的生根培養(yǎng)基配方采用MS基本鹽+0.3mg/L?6-BA+0.2mg/L?IAA+3%蔗糖+0.7%瓊脂+10%椰子水，PH至5.8。