[發明專利]一種紅曲霉高酯化力的培養方法在審
| 申請號: | 201410625201.0 | 申請日: | 2014-11-07 |
| 公開(公告)號: | CN105624096A | 公開(公告)日: | 2016-06-01 |
| 發明(設計)人: | 林蓮釵 | 申請(專利權)人: | 天津市寶坻區釀酒廠 |
| 主分類號: | C12N1/38 | 分類號: | C12N1/38;C12R1/66 |
| 代理公司: | 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211 | 代理人: | 楊慧玲 |
| 地址: | 300300 天津市寶坻*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 曲霉 酯化 培養 方法 | ||
技術領域
本發明涉及微生物培養領域,尤其涉及一種紅曲霉高酯化力的培養方法。
背景技術
紅曲霉以其能產大量的天然紅色素而受到關注。我國人民在12世紀的 宋代,就已經根據紅曲霉具有耐酸和耐高溫的特性,采用明礬調節酸度和用 酸米抑制雜菌的高溫培養法,選擇培養獲得了純度很高的紅曲。長期以來, 國內外微生物工作者對紅曲霉的研究大多集中在傳統的釀酒、制醋、著色劑 以及進行關于生產淀粉酶、糖化酶等的研究與探討。
紅曲霉是腐生真菌,生長的最適pH為3.5~5,能耐pH3.5,尤嗜乳 酸。生長溫度為26~42℃最適溫度32℃~35℃,能耐10%乙醇。紅曲霉的糖 化型β-淀粉酶活性較強,故可用來生產紅色麥芽糖。紅曲霉的蛋白酶活性 較高,故可用紅曲腌漬魚、肉、豆腐等高蛋白食品。
紅曲霉在一般釀酒行業中,現有的培養方法沒能有效發揮紅曲霉酯化能 力,且生長緩慢,影響了釀酒的產業。
發明內容
本發明要解決的問題是提供一種紅曲霉高酯化力的培養方法,解決紅曲 霉生長慢、酯化力低的問題。
為解決上述技術問題,本發明采用的技術方案是:
一種紅曲霉高酯化力的培養方法,采用高溫型紅曲霉,所述高溫型紅曲 霉購買自中國科學院生物所,所述擴大培養方法中用到三種培養基:麥芽汁 固體培養基、混合培養基和麩皮培養基,
所述麥芽汁固體培養基配方:麥芽汁140-150mL,瓊脂2.8-3g,98kPa 條件下滅菌30min,
所述混合培養基配方:麥芽汁與麩皮的配比為為7:3-6-4,98kPa條件 下滅菌30min,
所述麩皮培養基配方:麩皮為培養基質,葡萄糖0.5-0.6%,蛋白胨 1.3-1.4%,乳酸4.2-4.5‰,大豆油0.8-1.2%,乙醇5-6‰vol,98kPa條件 下滅菌1小時。。
如上所述一種紅曲霉高酯化力的培養方法,包括以下步驟:
1)將上述的紅曲霉從冰箱中取出,在32℃條件下培養4天,使紅曲霉活化;
2)取150mL麥芽汁,加入3g瓊脂,溶化后分裝到中號試管中,98kPa條件 下滅菌30min,制成所述的麥芽汁固體培養基,之后制斜面,接種所述 活化后的紅曲霉,置于32℃條件下,培養4天;
3)挑取所述斜面上培養后的紅曲霉接種到鋪有所述麥芽汁固體培養基的平 皿中,置于32℃條件下,培養4天;
4)將平皿培養好的紅曲霉接種到盛有所述混合培養基的培養盤上,置于35 ℃條件下培養,等菌絲布滿培養基,攪拌均勻,培養溫度降低到32℃, 等菌絲再次布滿培養基,顏色由白色轉化為紅色時,加入無菌水,每天 攪拌3-4次,并及時補充水分,保證水分維持在50%,在此條件下培養6 天;
5)按上述配方配制麩皮培養基,并置于98kPa條件下滅菌1小時,冷卻到 35℃,放入培菌室,之后將培養簾在架子上鋪開,并在培養簾上鋪2層 滅菌細紗布,將所述麩皮培養基在所述細紗布上均勻平鋪3-4cm,取所述 培養盤中紅曲霉和混合培養基倒入所述培養簾,接種比例1:10,置于35 ℃條件下培養3天菌絲即可長成,之后可出曲,烘干后粉碎備用。
本發明具有的優點和積極效果是:
紅曲霉一般的培養方法中,使用霉菌通用的培養基,紅曲霉生長緩慢, 且紅曲霉酯化力不能有效發揮,進而導致紅曲霉產生的酯化酶產量降低,采 用本發明的培養基和培養條件,能夠有效加快紅曲霉的生長速度,并大大提 高紅曲霉的酯化能力。
具體實施方式
以下對本發明做進一步說明。
一種紅曲霉高酯化力的培養方法,采用高溫型紅曲霉,購買自中國科學 院生物所,該培養方法中用到三種培養基:麥芽汁固體培養基、混合培養基 和麩皮培養基,其配方分別是:
麥芽汁固體培養基:麥芽汁140-150mL,瓊脂2.8-3g,98kPa條件下滅 菌30min;
混合培養基:麥芽汁與麩皮的配比為為7:3-6:4,98kPa條件下滅菌 30min;
麩皮培養基:麩皮為培養基質,葡萄糖0.5-0.6%,蛋白胨1.3-1.4%, 乳酸4.2-4.5‰,大豆油0.8-1.2%,乙醇5-6‰vol,98kPa條件下滅菌1小 時。
實施例1
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