[發明專利]藏藥坐珠達西的3種成分檢測及其化學代謝物輪廓分析方法

有效

• 申請號: 201410607071.8
• 申請日: 2014-10-30
• 公開（公告）號: CN104280476A
• 公開（公告）日: 2015-01-14
• 發明（設計）人: 曾銳;任桂友;王長生;董紅嬌;李金花
• 申請（專利權）人: 西南民族大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;全學榮

技術領域

本發明涉及一種坐珠達西的質量檢測方法。

背景技術

藏藥坐珠達西，收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準.藏藥》，標準編號：WS3-BC-0315-95，由寒水石、木香、丁香、船形烏頭、西紅花、肉豆蔻、草果、熊膽、牛黃、紅花、蓽茇、甘青青蘭、馬錢子、麝香等35味藥物組成，具有疏肝、健胃、清熱、愈潰瘍、消腫等功效，常用于“木布”病遷延不愈、胃脘嘈雜、消化不良、浮腫、水腫等。該制劑標準分為兩個理化鑒別、船形烏頭薄層鑒別以及丸劑的常規檢查。為提高標準，馬肖等進行了熊膽、牛黃、木香、丁香的薄層鑒別，馬錢子的HPLC定性鑒別，及西紅花苷Ⅰ的含量測定。專利申請號：201310496290.9，發明名稱：一種藥物組合物坐珠達西的檢測方法，該發明測定西紅花的含量，能對毒性藥材馬錢子進行含量檢測；還對蓽茇、牛黃和沒食子酸進行薄層色譜鑒別，能更全面準確地對藥物組合物坐珠達西進行檢測。

發明內容

本發明的技術方案是提供了一種新的坐珠達西的質量檢測方法。

本發明提供了一種坐珠達西的質量檢測方法，它是采用HPLC方法同時檢測槲皮素、胡椒堿、齊墩果酸，分別代表黃酮、生物堿、有機酸三大類成分，其色譜條件為：

采用Kromasil?C₁₈色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動相乙腈-0.02％磷酸溶液，梯度洗脫，流速1mL·min^-1，槲皮素檢測波長為255nm,胡椒堿檢測波長為340nm，齊墩果酸的檢測波長為210nm；

流動相乙腈(A)-0.02％磷酸溶液(B),梯度洗脫條件為：0～6min，36％A～42％A；6～12min，42％A～52％A；12～22min，52％A～65％A；22～30min，65％A～87％A；30～40min，87％A～92％A。

具體地，它包括如下步驟：

a、供試品溶液制備；

b、對照品溶液制備；

c、按權利要求1所述的色譜條件檢測。

其中，所述的供試品的制備方法為：取坐珠達西粉末，加入定量的有機溶劑，超聲提取。

其中，所述的供試品的制備方法為：坐珠達西粉末1.0g，所述的有機溶劑為甲醇，甲醇的用量為15-25ml，超聲時間為20-40min，超聲溫度為20-80℃。

其中，所述甲醇用量為15ml；超聲時間30min；超聲溫度64℃。

其中，所述的對照品溶液的制備方法為：取槲皮素、胡椒堿、齊墩果酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.1272，0.0426，0.502mg的溶液，即得各對照品溶液。

本發明通過對坐珠達西中槲皮素、胡椒堿、齊墩果酸3種成分(代表黃酮、生物堿、有機酸三大類成分)的含量測定方法。其中槲皮素為丁香、木香、草果、紅花等活性成分，有舒張胃腸平滑肌的作用，抑制胃癌細胞的惡性增殖等；胡椒堿為方中蓽茇的主要成分之一，具有廣泛的抗胃腸道疾病作用；齊墩果酸為方中甘青青蘭、丁香中的主要成分之一，具有清熱祛濕,舒肝和胃之功效。同時利用HPLC法同時測定3個廠家8批24個樣品中的槲皮素、胡椒堿、齊墩果酸3個成分的含量，并進行化學代謝物輪廓分析。本發明質量檢測方法中供試品制備條件穩定可行，HPLC含量測定方法穩定可靠，可用于藏藥坐珠達西的含量測定和質量控制。

附圖說明

圖1本發明坐珠達西供試品及標準品圖譜(其中，A1為檢測波長255nm供試品圖譜；A2為檢測波長255nm槲皮素標準品圖譜；B1為檢測波長340nm供試品圖譜；B2為檢測波長340nm胡椒堿標準品圖譜；C1為檢測波長210nm供試品圖譜；C2為檢測波長210nm齊墩果酸標準品圖譜)

圖2樣品的PCA圖

圖3坐珠達西樣品PCA打分圖的HCA分析柱狀圖

圖4坐珠達西樣品的PCA荷載圖(其中，峰-10.槲皮素，峰-40.胡椒堿，峰-71.齊墩果酸)

具體實施方式

實施例1本發明坐珠達西質量檢測方法

1材料

Waters?2695/2996型高效液相色譜儀，2996PDA檢測器，Empower化學工作站；KQ5200E型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；METILER?AE240S型電子天平(梅特勒-托利上海有限公司)。