[發明專利]一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法

在審

• 申請號: 201410604266.7
• 申請日: 2014-10-30
• 公開（公告）號: CN104345024A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 張典典;劉曉娟;周揚銘;鄭偉
• 申請（專利權）人: 廣州市祈和電器有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14
• 代理公司: 廣東廣信君達律師事務所 44329
• 代理人: 楊曉松

1.一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于按照以下操作步驟：

(1)制備完整細胞測試液：將鮮嫩果蔬原料剪成規格長×寬×高為0.1cm×0.1cm×0.1cm并混勻；精密稱取1.00g上述剪碎并混勻的材料置于普通陶瓷研缽中，同時準備50.00ml溶劑備用；用研杵在研磨速度為10～12轉/分鐘、研磨力度小于0.05牛頓的情況下將原料在研缽中均勻研磨5～7分鐘；研磨過程中根據原料的不同加入0～5ml備用溶劑于研缽中以方便研磨；研磨結束后，將漿液倒入容器中，并用上述備用溶劑多次洗滌研缽和缽杵至轉移干凈為止；合并漿液、洗滌液和剩余備用溶劑，此液體則為完整細胞測試液；

(2)制備破壁細胞測試液：精密稱取1.00g經過破壁加工技術處理的待測鮮嫩果蔬原料置于容器中，加入50.00ml溶劑，攪拌制成懸浮液，此懸浮液即為破壁細胞測試液；

(3)細胞破壁率的檢測

a、準備能夠應用血球計數板進行計數的顯微鏡和血球計數板；

b、分別搖勻或用玻棒攪勻上述完整細胞測試液和破壁細胞測試液后立即進行取樣和裝片處理，裝片時要使測試液布滿血球計數板上的整個玻片；取樣體積為0.5μl；

c、裝片后將玻片置于顯微鏡下觀察，調整顯微鏡焦距，確定合適的觀察倍數；

d、在顯微視野下，根據原料的不同，選擇適宜的顯微特征物作為細胞破壁率測定的典型顯微特征物并進行計數；

e、按以下公式計算細胞破壁率：細胞破壁率(％)＝(完整細胞測試液中典型顯微特征物數量-破壁細胞測試液中典型顯微特征物數量)/完整細胞測試液中典型顯微特征物數量×100％。

2.根據權利要求1所述的一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于：步驟(1)和(2)所述溶劑是純凈水、甘油、水合氯醛或者質量比為1：1的硫酸鋅與乙醇液混合液。

3.根據權利要求1所述的一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于：步驟(1)和(2)所述溶劑是純凈水。

4.根據權利要求1所述的一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于：步驟(1)所述鮮嫩果蔬原料為在研磨速度為10～12轉/分鐘、研磨力度小于0.05牛頓的情況下能用研磨的方法使原料中的細胞分離而不造成細胞破壁的原料，包括新鮮的蘋果、西瓜、西紅柿、甜菜根或小白菜。

5.根據權利要求1所述的一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于：步驟(2)所述經過破壁加工技術處理的待測鮮嫩果蔬原料是指已經經過普通粉碎、超微粉碎、納米技術、攪拌破壁加工技術處理的，可以直接用水或溶劑進行配制成懸浮液的原料。

6.根據權利要求1所述的一種檢測破壁鮮嫩果蔬原料中的細胞破壁率的方法，其特征在于：步驟d所述顯微特征物為植物細胞中的石細胞、厚壁細胞、淀粉粒、油脂滴或長纖維細胞。