[發明專利]金線蓮種子與真菌共生萌發快速成苗的方法

有效

• 申請號: 201410582811.7
• 申請日: 2014-10-28
• 公開（公告）號: CN104350838A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 趙有林;崔保登
• 申請（專利權）人: 桂林保林生物技術有限公司
• 主分類號: A01C1/02
• 分類號: A01C1/02;A01G1/04
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

1.金線蓮種子與真菌共生萌發快速成苗的方法，其特征在于包括以下步驟:

（1）金線蓮共生萌發真菌的分離、純化：

選取野生金線蓮健壯幼苗根狀莖的頂端突起部位、或是根狀莖的節上突起部位；將這一部位用70%酒精表面消毒3-5s，置于清水瓊脂培養基中培養、分離、純化；

（2）制備金線蓮共生萌發真菌的液體菌種：

將分離純化后的金線蓮有效共生萌發真菌—絲核菌，保藏號為CGMCC?No.9728，從低溫保藏的斜面試管活化后，制備成液體共生菌種備用；

液體菌種的配制比例為：20%馬鈴薯提取液∶1—5%山毛櫸科樹葉提取液∶0.5—1.5%白砂糖；

山毛櫸科樹葉提取液的制備：將山毛櫸科樹葉與水按1：5的比例混合，煮沸半小時，濾出原液制成；

（3）制備金線蓮共生萌發絲核菌的固體培養基：

培養基由山毛櫸科樹葉、山毛櫸科木屑、麥麩或米糠按照比例混合，再經過高溫殺菌，然后將絲核菌的液體菌種接種到培養基上，在溫度為25℃—27℃的環境下培養，待共生真菌長滿整個培養基，等待播種；

所述培養基原料配制的比例為：山毛櫸科樹葉30-45%∶山毛櫸科木屑30-45%∶米糠或麥麩10-40%，培養基的含水量為60—62%；

（4）金線蓮種子的播種與暗培養：

將成熟的金線蓮種子撒播在長滿共生真菌的培養基上，在溫度為25—27℃的環境下，暗培養45—60天，金線蓮種子與共生真菌共生萌發成長為粗壯的原球莖；

（5）金線蓮原球莖的轉移與光培養：

將粗壯的金線蓮原球莖轉移至山毛櫸科樹葉：山毛櫸科木屑體積比為1：1～1：3的混合基質中，在光照強度為1000-3000Lux，光照時間為10-12h/d，溫度為25℃-27℃的條件下，光培養20—30天，成長為具有原生態的仿野生金線蓮幼苗。