[發明專利]一種高F值豬血寡肽的提取方法

有效

• 申請號: 201410547567.0
• 申請日: 2014-10-16
• 公開（公告）號: CN104381585B
• 公開（公告）日: 2017-02-15
• 發明（設計）人: 劉觀洲;鄧自偉;沙歡;李寧豐
• 申請（專利權）人: 浙江索納克生物科技有限公司
• 主分類號: A23J3/12
• 分類號: A23J3/12;A23J3/34
• 代理公司: 湖州金衛知識產權代理事務所(普通合伙)33232
• 代理人: 裴金華

1.?一種高F值豬血寡肽的提取方法，其特征在于依次通過以下步驟制備而成：

(1)豬血血紅蛋白溶液制備：將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質量比1：2-5：0.01-0.03混合的檸檬酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中檸檬酸二鈉與豬血的重量比為1-2：1000，混合均勻后在15-25℃第一次碟式離心分離3-6min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入去離子水，在1800-2500W的超聲波功率下第一次超聲波處理30-60s獲得豬血血紅蛋白溶液；

所述從天然植物中提取的植物酚為茶多酚或蘋果多酚；

(2)前處理：使用氮氣鼓泡脫氧對所述豬血血紅蛋白溶液進行第一次物理脫氧和初步脫色，然后將脫氧后的所述豬血血紅蛋白溶液調節pH值至6-7，然后在600-800W的超聲波功率下第二次超聲波處理50-90s獲得前處理液；

(3)分段酶解脫色：將所述前處理液升溫至28-35℃，調節pH值至8.5-9.5,加入第一復合酶并保溫1-1.5h，所述第一復合酶由動物蛋白水解酶、枯草菌蛋白酶、風味蛋白酶和堿性蛋白酶按質量比1：1-2：0.5-0.8：0.2-0.4混合而成，所述動物蛋白水解酶與所述豬血血紅蛋白溶液的濃度比為10000-20000U/g；然后再升溫至45-50℃，調節pH值至10-12,加入第二復合酶并保溫1.5-2h后終止酶解反應獲得酶解脫色液；所述第二復合酶由枯草菌蛋白酶和堿性蛋白酶按質量比1：2-3混合而成；所述第一復合酶與所述第二復合酶的質量比為3-5：1；

(4)活性炭高F值化處理：向所述酶解脫色液中加入占其重量為8-10%的活性炭在溫度為30-38℃進行吸附處理50-100min獲得活性炭高F值化處理液；

(5)后處理：將所述活性炭高F值化處理液調節pH值至4-5，水浴15-25min，在15-25℃第二次碟式離心分離2-5min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.5-0.8MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液；

所述超濾膜為聚偏氟乙烯超濾膜，截留分子量為6000-8000Da；

(6)噴霧干燥：以可溶性淀粉為載體，將所述第二濃縮液進行噴霧干燥獲得乳白色的豬高F值豬血寡肽。

2.?根據權利要求1所述的一種高F值豬血寡肽的提取方法，其特征在于：取所述后處理步驟中獲得的第二沉淀層物質，在-10--15℃冷凍1-2h，自然解凍后添加1-2倍去離子水洗滌，然后進行離心分離，取離心分離獲得的沉淀物，添加0.1-0.2倍去離子水洗滌后，進行第二次物理脫氧，接著再離心分離，最后冷凍干燥得到血紅素肽。

3.?根據權利要求2所述的一種高F值豬血寡肽的提取方法，其特征在于：所述噴霧干燥的進風溫度為190-240℃，出風溫度為60-70℃，最大水分蒸發量為3-5kg/h。

4.?根據權利要求3所述的一種高F值豬血寡肽的提取方法，其特征在于：所述豬血血紅蛋白溶液制備具體是將檢驗合格的生豬采血后，加入按照質量比1：3：0.03混合的檸檬酸二鈉、碳酸氫鈉和從天然植物中提取的植物酚，其中檸檬酸二鈉與豬血的重量比為1.5：1000，混合均勻后在20℃第一次碟式離心分離4min，獲得第一上清層和第一沉淀層，分離獲得第一沉淀物，往第一沉淀物中加入1.8-2倍體積的去離子水，在2000W的超聲波功率下第一次超聲波處理50s獲得豬血血紅蛋白溶液。

5.?根據權利要求4所述的一種高F值豬血寡肽的提取方法，其特征在于：所述后處理是將所述酶解脫色液調節pH值至4-5，在溫度為10-18℃的水浴中處理15-25min，在18℃第二次碟式離心分離3min，獲得第二上清層和第二沉淀層；取第二上清層在壓力為0.6MPa下超濾膜過濾濃縮分離獲得第二濃縮液。