[發明專利]一種利用熱榨花生粕制備葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法

在審

• 申請號: 201410547450.2
• 申請日: 2014-10-16
• 公開（公告）號: CN104342475A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 齊宏濤
• 申請（專利權）人: 青島博之源生物技術有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 史霞

1.一種利用熱榨花生粕制備葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法，包括以下步驟：

（1）花生粕粉碎過150目篩，篩下物加入石油醚脫脂，干燥得到脫脂的花生粕粉，加入蒸餾水，微波加熱混合均勻，調節pH值，加入復合植物水解酶Viscozyme?L，微波輔助酶解，得到Viscozyme?L酶解液；

（2）調節Viscozyme?L酶解液pH值，加入復合蛋白酶，微波輔助酶解，滅酶，離心；

（3）上清液1加入4倍于其體積的無水乙醇，冰箱中靜置過夜，離心，上清液2真空旋轉蒸發濃縮，超濾膜分離濃縮，透過液冷凍干燥得到葡萄糖苷酶抑制活性肽。

2.根據權利要求1所述的利用熱榨花生粕制備葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法，其特征在于：步驟（1）所述的花生粕粉碎篩下物與石油醚的質量與體積比為1:8.3-10.2（g/ml），石油醚沸程為30-60℃，脫脂的條件為51℃恒溫水浴振蕩器中，以325r/min轉速往復式振蕩脫脂16h，通風櫥中揮發干燥，脫脂的花生粕粉與蒸餾水的質量與體積比為1:9.7-10.7（g/ml），微波功率800w、加熱溫度47.5℃、加熱時間3.2min條件下混合均勻，pH值調節至4.8-5.8，Viscozyme?L加入量為每克花生粕粉17.5-20.5FBG（FBG為Viscozyme?L的酶活單位），微波功率800w、加熱溫度45.5-52.5℃、加熱時間8.5-10.5min條件下酶解。

3.根據權利要求1所述的利用熱榨花生粕制備葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法，其特征在于：步驟（2）所述的pH值調節至7.2-8.2，復合蛋白酶為堿性蛋白酶Alcalase、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶Neutral?Protease、無花果蛋白酶以2.1:1.8:2.5:2.6比例混合的復合蛋白酶，加入量為每克花生粕粉5000-7000U（U為復合蛋白酶的酶活單位），酶解的條件為微波功率800w、加熱溫度50-60℃、加熱時間4.5-12.5min，100℃滅酶5min，7200r/min離心18min。

4.根據權利要求1所述的利用熱榨花生粕制備葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法，其特征在于：步驟（3）所述的離心條件為7200r/min離心18min，在水浴加熱溫度73℃、真空度0.1MPa條件下，以224r/min轉速真空旋轉蒸發濃縮，Labscale小型切向流超濾系統中以3.45bar壓力、25℃、34ml/min進料流速、10kDa的Pellicon?XL超濾膜管匣進行一級超濾，再以4.25bar壓力、25℃、24ml/min進料流速、5kDa的Pellicon?XL超濾膜管匣進行二級超濾分離濃縮，冷凍干燥條件為-55℃、真空度0.1MPa，干燥48h。