[發明專利]一種磁性載體微囊化干細胞及其制備方法

在審

• 申請號: 201410519201.2
• 申請日: 2014-09-30
• 公開（公告）號: CN104257631A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 周萱
• 申請（專利權）人: 奧思達干細胞有限公司
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K35/48;A61K47/36;A61K47/04;A61K49/06
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技術領域

本發明涉及一種磁性載體微囊化干細胞及其制備方法，屬于生物化工和干細胞生物技術領域。

背景技術

隨著對干細胞研究的深入，干細胞移植（stem?cell?transplantation，SCT）讓人們看到新的希望，并取得不少進展?；A研究顯示，干細胞具有分化為多種細胞的潛能，干細胞移植具有促進細胞因子分泌、改善微循環、對抗凋亡等作用。用干細胞技術來治療各種組織損傷性疾病為克服傳統治療的不足提供了一種新的技術手段。近十年來細胞治療發展迅速，國內外已有大量干細胞移植治療終末期肝病、心肌梗死、擴張型心肌病、心功能衰竭、血液病、糖尿病、糖尿病足、進行性老年性癡呆、帕金森病等頑固重癥的臨床報道。因此，許多研究者致力于通過細胞移植來修復受損組織及功能，促進微循環建立，減少截肢或器官移植，改善患者預后。干細胞應用于疾病的治療得到了越來越多研究的證實，基礎研究及臨床試驗已取得令人鼓舞的研究成果。

干細胞移植常用的途徑是靜脈移植，其優點是創傷小、容易被患者所接受，經靜脈移植避免損傷肌體組織，且可以通過反復多次移植來彌補到達病灶區干細胞少之不足。但經靜脈進行干細胞移植的不利因素在于從外周靜脈進入病灶區需經長時遷移，最后進入病灶內的細胞數量十分有限，從而影響移植效率。從理論上來講，大量的移植細胞沒有進入所希望治療的病灶區域，而是在血液循環中消耗掉了，加大移植細胞的數量的話，理論上可能有足夠數量的干細胞進入病灶區域發揮作用，但同時會使治療成本升高。

其他途徑有動脈移植、局部種植、腰穿途徑和介入途徑等，相比靜脈移植風險較高，如立體定向顱內注射移植和脊髓局部注射移植等，但在一定程度上增加了細胞到達病灶區域的數量。以上幾種干細胞移植途徑均有優劣，移植途徑受局部組織條件、安全性、技術水平等因素限制，我們應該在各種方法基礎上進一步完善和改進。在干細胞移植時，使用創傷小、容易被患者所接受的移植方法，同時使干細胞高效率地進入病灶區域發揮作用，降低治療成本，減少移植次數，達到最好的治療效果。

在干細胞移植中，免疫排斥反應是一項重要的障礙，移植物與受體的組織相容性問題是臨床醫生欲成功進行細胞移植時不得不面對的主要問題。因此，解決異體移植的免疫排斥反應是干細胞治療中的難點。

干細胞療法在機體生長、發育及器官組織修復過程中已經表現出巨大的潛力，在臨床應用上發展前景也十分廣闊，因此，解決干細胞特別是異體干細胞在移植過程中的免疫排斥反應，同時使干細胞高效率地進入病灶區域發揮作用的問題很有必要，?這將有助于將干細胞療法轉化為有效的臨床應用治療。

發明內容

本發明公開了一種磁性載體微囊化干細胞及其制備方法，磁性載體微囊化干細胞是利用含有磁性物質的半透膜功能的小球囊，將功能性干細胞包裹于此球囊內而成，可用于干細胞的異體移植治療或靶向移植治療，收集的磁性載體微囊化的干細胞經靜脈或動脈移植至宿主體內，然后在外加磁場的作用下定位至病變部位發揮作用，同時可利用磁性載體可用作磁共振成像造影劑檢測治療效果。

為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現：

一種磁性載體微囊化干細胞，包括功能性干細胞和包裹功能性干細胞的含有磁性物質的半透膜功能的小球囊組成，所述的磁性物質為親水性順磁四氧化三鐵納米粒，所述的半透膜功能的小球囊是由殼聚糖和海藻酸鈉制備而成。

進一步的，所述的功能性干細胞包括可進行臨床研究應用的干細胞，尤其是用于異體移植的干細胞。

進一步的，所述的一種磁性載體微囊化干細胞的移植注射時間是成囊后第4天。

進一步的，所述的一種磁性載體微囊化干細胞具有磁響應性，可在外加磁場作用下進行定位。

進一步的，所述的一種磁性載體微囊化干細胞可利用四氧化三鐵納米粒特性，具有造影成像功能。

一種磁性載體微囊化干細胞的制備方法，由下述步驟組成：

（1）制備無菌海藻酸鈉、殼聚糖溶液：分別制備1.5%的海藻酸鈉溶液和0.5%的殼聚糖溶液，然后使用于0.22μm濾膜過濾除菌備用；

（2）制備干細胞懸液：收集常規培養好的功能性干細胞，用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗3次，再用PBS溶液制成濃度不小于10⁷個/ml的單細胞懸液；