[發明專利]鏈霉菌菌株及其防治黃瓜枯萎病聯合應用

在審

• 申請號: 201410509460.7
• 申請日: 2014-09-29
• 公開（公告）號: CN104342389A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 馬正;俞曉平;路丹丹;羅帥;邊亞琳;許益鵬;王正亮;申屠旭萍
• 申請（專利權）人: 中國計量學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/47;C12R1/465
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

1.?一種鏈霉菌菌株，其特征在于：菌株2013分類命名為白色鏈霉菌（Streptomyces?albus）2013，保藏單位：中國典型培養物保藏中心，保藏日：2013年6月19日，保藏登記號為CCTCC?NO:?M?2013269；另一種鏈霉菌菌株M929，其特征在于：菌株M929分類命名為暗黑鏈霉菌（Streptomyces?tenebrarius）M929，保藏單位：中國典型培養物保藏中心，保藏日：2013年12月25日，保藏登記號為CCTCC?NO:?M?2013710。

2.?一種如權利要求1所述的鏈霉菌菌株的應用，其特征在于：所述的白色鏈霉菌2013和暗黑鏈霉菌M929均能發酵產生對黃瓜枯萎病菌（Fusarium?oxysporum?f.?sp.?cucumebrium）具有較強拮抗作用的活性物質，可防治黃瓜枯萎病病害，龜裂鏈霉菌2013和M929兩者的代謝產物重量百分比為3:2—1:1時，效果顯著。

3.?權利要求2所述的應用，其特征在于：所述的白色鏈霉菌2013和M929兩者的代謝產物的制備方法如下：

（1）將分離得到的白色鏈霉菌2013和暗黑鏈霉菌M929涂布于甘露醇黃豆餅粉制成的MS平板上，收集孢子接種于發酵培養基；

（2）發酵培養基為每1?L中含有黃豆餅粉10g，玉米粉4g，可溶性淀粉20g，葡萄糖5g，蛋白胨5g，CoCl_2?0.02g，牛肉膏5g，CaCO_3?5g，酵母膏5g，每300mL三角瓶裝發酵培養液50mL；配制后121℃滅菌20min，將利用馬鈴薯葡萄糖液體培養基培養好的Streptomyces?albus?2013和Streptomyces?tenebrarius?M929分別按5%（v/v）接入發酵培養基中，在28℃±l℃條件下，搖床轉速180?r/min，發酵培養84?h；

（3）發酵結束后離心收集發酵液，加入等體積的乙酸乙酯，充分震蕩混勻，取上層，在真空條件下濃縮至浸膏；

（4）混合制劑配制：將Streptomyces?albus?2013和Streptomyces?tenebrarius?M929代謝產物用水溶解，混合，配成終濃度為0.06g/L?Streptomyces?albus?2013代謝產物和0.04g/L?Streptomyces?tenebrarius?M929代謝產物混合配方制劑。