[發明專利]植物耐低溫基因SnRK2.6/OST1的應用在審
| 申請號: | 201410509412.8 | 申請日: | 2014-09-28 |
| 公開(公告)號: | CN104313039A | 公開(公告)日: | 2015-01-28 |
| 發明(設計)人: | 楊淑華;丁楊林;張曉燕 | 申請(專利權)人: | 中國農業大學 |
| 主分類號: | C12N15/54 | 分類號: | C12N15/54;C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100193 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 植物 低溫 基因 snrk2 ost1 應用 | ||
1.植物耐低溫基因SnRK2.6/OST1的應用,其特征在于,通過在植物中過表達SnRK2.6/OST1基因,獲得耐低溫的轉基因植物;
其中,SnRK2.6/OST1基因的序列為:
i)Seq?ID?No.1所示的核苷酸序列;或
ii)Seq?ID?No.1所示的核苷酸序列經取代、缺失和/或增加一個或多個核苷酸且表達相同功能蛋白質的核苷酸序列;或
iii)在嚴格條件下與Seq?ID?No.1所示序列雜交的核苷酸序列;
所述嚴格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述植物包括單子葉植物和雙子葉植物。
3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述植物包括但不限于擬南芥。
4.一種構建耐低溫的轉基因擬南芥的方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)提取擬南芥總RNA,反轉錄獲得cDNA,以cDNA為模板,F和R為引物,擴增SnRK2.6/OST1基因,將擴增產物構建到表達載體pSuper1300上,獲得的重組表達載體命名為Super:SnRK2.6/OST1;
2)用Super:SnRK2.6/OST1轉化農桿菌GV3101,然后利用轉化的農桿菌侵染擬南芥花序,獲得耐低溫的轉基因擬南芥幼苗;
其中,步驟1)中所述引物F和R的核苷酸序列如Seq?ID?No.3和4所示。
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