[發明專利]一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條及其制備方法

有效

• 申請號: 201410499528.8
• 申請日: 2014-09-25
• 公開（公告）號: CN104267179A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 韓志成
• 申請（專利權）人: 句容市農業技術推廣中心
• 主分類號: G01N33/559
• 分類號: G01N33/559;G01N33/577
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王云

1.一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述試紙條含有襯板（1）和依次排列在襯板（1）上的樣品墊（2）、金標結合墊（3）、纖維素膜（4）和吸水墊（7），所述金標結合墊（3）內吸附有異氯硫磷金標抗體，所述纖維素膜（4）上有隱形檢測線（5）和隱形對照線（6），所述隱形檢測線（5）用異氯硫磷半抗原偶聯的載體蛋白溶液印制，所述隱形對照線（6）用兔抗鼠IgG抗體印制。

2.根據權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述異氯硫磷金標抗體為膠體金標記的異氯硫磷單克隆抗體。

3.根據權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述的偶聯異氯硫磷半抗原的載體蛋白為牛血清白蛋白BSA、雞卵清白蛋白OVA或人血清白蛋白HAS中的一種或幾種。

4.根據權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，在試紙條的吸水墊上設有手柄端保護膜，在樣品墊上設有樣品浸入端保護膜。

5.根據權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述的樣品墊用玻璃纖維棉、尼龍膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜中的一種或幾種制成。

6.根據權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述的纖維素膜為硝酸纖維素膜、純纖維素膜或羧化纖維素膜中的一種或幾種。

7.權利要求1所述的一種異氯硫磷膠體金快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）異氯硫磷半抗原的合成；

2）異氯硫磷半抗原與載體蛋白偶聯得到異氯硫磷半抗原偶聯的載體蛋白溶液；

3）異氯硫磷金標抗體的制備；

4）金標結合墊的制備；

5）兔抗鼠IgG抗體的制備；

6）異氯硫磷半抗原偶聯的載體蛋白溶液和兔抗鼠IgG抗體包被纖維素膜；

7）試紙條的組裝。

8.根據權利要求7所述的異氯硫磷金快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述步驟1）中異氯硫磷半抗原的合成步驟如下：

81）O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）硫代磷酰氯的合成：稱取2-氯-4-硝基苯酚3.7?g用乙腈溶解；常溫下，將溶液逐滴加入20?mL乙腈溶解的O-甲基硫代磷酰氯3.83?g、粉狀K₂CO₃?8.7?g混合溶液，滴完后，繼續反應1?小時，反應完畢后真空過濾，蒸去溶劑，得黃色油狀物，柱層析，用體積比8：1的石油醚∕二氯甲烷洗滌，蒸去溶劑得淡黃色油狀液體5.9?g；

82）異氯硫磷半抗原：O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）-N-?(丁酸)硫代磷酸酯的合成：稱取4-氨基丁酸0.54?g、KOH?0.78?g，溶解于6?mL甲醇中，冰水浴冷卻至0-10?℃，攪拌下緩慢加入溶解于6?mL甲醇溶液的步驟（81）得到的黃色油狀液體1.28?g，保溫反應2?小時，反應完畢后，用體積比7：1的石油醚∕乙醚洗滌，水層調pH?=?3.?0后用乙醚提取，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，得淺黃色油狀物O-甲基-O-（2-氯-4-硝基苯基）-N-（丁酸）硫代磷酸酯1.23g。