[發明專利]由自體血漿構建的組織工程神經修復材料及其制備方法

在審

• 申請號: 201410497748.7
• 申請日: 2014-09-25
• 公開（公告）號: CN104324417A
• 公開（公告）日: 2015-02-04
• 發明（設計）人: 諸葛啟釧;金坤林;張紅霞
• 申請（專利權）人: 溫州醫科大學附屬第一醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/38;A61L27/54;A61L27/02;A61L27/22;A61L27/50
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司 33211
• 代理人: 吳繼道

1.一種由自體血漿構建的組織工程神經修復材料，其特征在于：包括載體和種子細胞，所述載體由含有纖維蛋白原和細胞生長因子的自體血漿與凝聚物構建而成，所述種子細胞為自體骨髓間充質干細胞。

2.根據權利要求1所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料，其特征在于：所述含有纖維蛋白原的血漿和凝聚物以體積比1:1～3:7混合。

3.根據權利要求1或2所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料，其特征在于：所述凝聚物為鈣離子溶液或者氯化鈣-凝血酶混合溶液中的一種。

4.根據權利要求3所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料，其特征在于：所述鈣離子濃度為10～50mmol/L；所述凝血酶濃度為0～2U/ml。

5.一種制備權利要求1所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）種子細胞的準備：用含抗凝劑的采血管獲取自體靜脈血，3000rpm離心5-10min，提取上層清液，得到含有纖維蛋白原與細胞生長因子的血漿；

（2）血漿的制備：獲取自體靜脈血，靜置到分層，提取上層清液，得到含有纖維蛋白原與細胞生長因子的血漿；

（3）氯化鈣-凝血酶混合溶液的制備：（3a）配制濃度為10～50mmol/L的鈣離子溶液；（3b）取步驟（3a）中的鈣離子溶液稀釋凝血酶至0～1U/ml，得到氯化鈣-凝血酶溶液；

（4）將步驟（3）所獲得的氯化鈣-凝血酶混合液加入步驟（2）所獲得的血漿中，混合均勻，得到纖維蛋白/凝聚物載體；

（5）取步驟（1）所獲得的骨髓間充質干細胞加入步驟（4）所獲得的纖維蛋白/凝聚物載體中，得到骨髓間充質干細胞/纖維蛋白-凝聚物神經修復材料。

6.根據權利要求5所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料的制備方法，其特征在于：

所述步驟（1）中種子細胞的準備：用差速培養法體外培養自體骨髓細胞，通過完全培養基培養增殖；

根據權利要求5或6所述的由自體血漿構建的組織工程神經修復材料的制備方法，其特征在于：

所述步驟（3）中氯化鈣-凝血酶混合溶液的制備：步驟（3a）取濃度為450mmol/L的醫用氯化鈣用PBS稀釋液稀釋配制濃度為10～50mmol/L的鈣離子溶液。