[發明專利]一種靶向脂肪酸合成酶的調控因子及其應用

在審

• 申請號: 201410480211.X
• 申請日: 2014-09-19
• 公開（公告）號: CN104232648A
• 公開（公告）日: 2014-12-24
• 發明（設計）人: 苗向陽
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種綿羊miRNA，其特征在于，所述miRNA為miR-4749-5，序列為SEQ?ID?NO?1。

2.根據權利要求1所述的miRNA，其特征在于，所述miRNA的靶標基因是FAS。

3.根據權利要求1或2任意一項所述的miRNA，其特征在于，所述miRNA在優良肉用綿羊品種的脂肪組織中低表達。

4.一種檢測權利要求1-3任意一項所述的miRNA表達水平的熒光定量PCR試劑盒。

5.根據權利要求4所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，所述熒光定量PCR試劑盒組分包括：用于擴增miR-4749-5的特異性引物、熒光定量PCR反應液。

6.根據權利要求5所述的熒光定量PCR試劑盒，其特征在于，特異性引物是SEQ?ID?NO?3和SEQ?ID?NO?4組成的引物對或者是SEQ?ID?NO?5。

7.一種通過檢測權利要求1-3任意一項所述的分子標記miRNA檢測綿羊肌肉品質的方法，其特征在于，采用下列檢測方法中的一種或幾種：基于核苷酸雜交基礎上的方法，如RNA印跡技術、原位雜交技術、基于微球的流式細胞術和微陣列技術；夾板連接法；基于PCR基礎上的方法，如加尾法、小靶點定量PCR和莖環法。

8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，采用加尾法和/或莖環法檢測綿羊脂肪組織中miRNA的表達。

9.根據權利要求7或8任意一項所述的檢測方法，其特征在于，所述加尾法檢測miRNA表達水平的步驟：(1)提取綿羊脂肪組織中的小RNA；(2)通過poly(A)聚合酶和反轉錄酶進行miRNA加尾和反轉錄；(3)采用適用于加尾法的熒光定量PCR試劑盒進行miR-4749-5的擴增；所述莖環法檢測miRNA表達水平的步驟：(1)提取綿羊脂肪組織中的總RNA；(2)通過反轉錄引物在反轉錄酶的作用下進行miRNA反轉錄；(3)采用適用于莖環法的熒光定量PCR試劑盒進行miR-4749-5的擴增。

10.權利要求1-3任意一項所述的分子標記和/或權利要求4-6任意一項所述試劑盒和/或權利要求7-9任意一項所述的檢測方法在遺傳標記輔助育種、改善肉用綿羊肌肉品質中的應用。