[發明專利]新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法

在審

• 申請號: 201410477930.6
• 申請日: 2014-09-18
• 公開（公告）號: CN104208746A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 劉鐘陽;黃景輝;羅卓荊;朱澍;劉靚
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: A61L27/02
• 分類號: A61L27/02;A61L27/20;A61L27/50
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法，其特征在于按照以下步驟進行：

步驟1：制備磁性納米微粒MNPs；

分別配制0.1mol/L的Fe3+及Fe2+溶液，在通氮氣條件下，按照Fe3+:Fe2+摩爾比為2:1混合，機械攪拌3～4h，使其充分混合，然后向混合溶液中滴加1mol/L的NaOH溶液，直至混合溶液pH＝9～10，水浴加熱2h后靜置5h，移去上層清液，將生成的粒子減壓抽濾，用蒸餾水及無水乙醇反復進行洗滌，洗去粒子表面的雜質離子，將粒子在50℃下真空干燥，研磨過篩，得到MNPs；

步驟2：制備磁性凝膠狀混濁液；

將β-甘油磷酸鈉溶液滴定殼聚糖混濁液，使混合液最終的pH＝7.0～7.2，然后將所得的混濁液在預冷好的冷凍干燥機中凍干24h，得到殼聚糖/β-甘油磷酸鈉混合物粉末，將殼聚糖/β-甘油磷酸鈉混合物粉末與磁性納米微粒混合，加入去離子水，2～6℃下，15000rpm，攪拌80～120min，制得磁性混濁液，4℃下將磁性混濁液抽真空20～24h，再靜置10h，即制得磁性凝膠狀混濁液；

步驟3：制備神經組織工程材料；

將磁性凝膠狀混濁液倒入神經組織工程材料成形模具中，以小鐵夾固定成形模具的兩端，在微型調速儀下，以垂釣的方式將成形模具順軸向以2×10-5m/s的速度緩慢浸入液氮中，對模具中的磁性凝膠狀混濁液進行冷淋固形處理，待模具完全浸入液氮后，繼續在液氮中保留10h～14h；將模具連同內部注入的磁性凝膠狀混濁液一同轉入-80℃的冰箱中冷藏，冷藏24h后取出，迅速去除成形模具兩端的鐵夾和銅管，之后放置于預冷好的冷凍干燥機中凍干36h～40h，其中冷凍干燥機設置的預冷參數為：-60℃、100mtorr；將凍干處理后的模具放置于真空狀態下并升溫至0℃，保持4h～6h，之后再升溫至20℃～24℃，保持30min～60min，解除真空狀態，升至常溫，得到導管狀的神經組織工程材料，導管狀的神經組織工程材料為磁性可降解神經導管，將導管從成形模具中取出；

步驟4：交聯消毒處理；

將神經組織工程材料放入京尼平和無水乙醇混合溶液中進行交聯處理，交聯時間為46h～50h，每克神經組織工程材料加入20ml京尼平和無水乙醇混合溶液，交聯處理后將神經組織工程材料用去離子水和質量百分濃度為95％的酒精交替清洗25min～35min，然后置于常溫下干燥一周，最后用60Co照射神經組織工程材料，進行消毒處理，得到消毒后的神經組織工程材料。

2.按照權利要求1所述新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法，其特征在于：所述步驟2中殼聚糖混濁液，其制備方法為每20mg殼聚糖加入1.2ml冰醋酸，經22h～26h的溶解處理，制得殼聚糖混濁液。

3.按照權利要求1所述新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法，其特征在于：所述步驟2中β-甘油磷酸鈉溶液制備方法為每1mgβ-甘油磷酸鈉加入1ml去離子水，充分攪拌后，制得β-甘油磷酸鈉溶液。

4.按照權利要求1所述新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法，其特征在于：所述步驟2中，磁性納米微粒質量為殼聚糖/β-甘油磷酸鈉混合物粉末質量的5～20％，在每100mg磁性納米微粒與殼聚糖/β-甘油磷酸鈉混合物粉末的混合物中加入5ml去離子水。

5.按照權利要求1所述新型磁感應性可降解神經組織工程材料的制備方法，其特征在于：所述步驟4中，京尼平和無水乙醇混合溶液中，京尼平占混合溶液總質量的1％。