[發明專利]同時測定小柴胡顆粒中環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸含量的方法

有效

• 申請號: 201410476780.7
• 申請日: 2014-09-18
• 公開（公告）號: CN104198617A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 郝鳳霞;郝洪濤
• 申請（專利權）人: 寧夏大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 寧夏專利服務中心 64100
• 代理人: 趙明輝

1.一種同時測定小柴胡顆粒中環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)制備對照品儲備液：

分別精密稱取環磷酸腺苷、甘草酸和黃芩苷對照品各0.0020g，首先用50％甲醇(V:V)溶解，再轉移至10mL容量瓶中，然后用50％甲醇(V:V)定容至刻度，搖勻，分別配制成三個0.20mg/mL的對照品溶液，分別記為1號樣品、2號樣品、3號樣品；

(2)制備供試品溶液：

將小柴胡顆粒研磨至粉末后，過80目篩，準確稱取5.000g至錐形瓶內，加入50mL的50％的甲醇(V:V)搖勻，放入數控超聲波清洗器內超聲30min，離心5min，用定性濾紙過濾，取上清液，用50％的甲醇(V:V)定容至50mL，用0.45um的定性濾紙過濾后，制成供試品溶液；

(3)高效液相色譜測定：

用高效液相色譜儀進行測定；依次分別從步驟(1)得到的1號樣品吸取0.1ul、0.3ul、1ul、2.5ul、5ul、10ul，2號樣品吸取1ul、2.5ul、5ul、10ul、30ul、50ul，3號樣品吸取1ul、2.5ul、5ul、10ul、20ul、30ul，分別進樣，按色譜條件測定，以峰面積和對照品體積做校正曲線，Y代表峰面積，X代表體積，R代表相關系數，得到環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸的回歸方程分別為：Y＝242.17X-35.103，R²＝0.9969；Y＝178.38X+97.653,R²＝0.9998；Y＝113.69X+94.29，R²＝0.9987。

2.如權利要求1所述的同時測定小柴胡顆粒中環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸含量的方法，其特征在于：步驟(2)中用數控超聲波清洗器進行超聲是在200W，40kHz，30℃的條件下。

3.如權利要求1所述的同時測定小柴胡顆粒中環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸含量的方法，其特征在于：步驟(2)中離心是在2000轉/分鐘條件下進行的。

4.如權利要求1所述的同時測定小柴胡顆粒中環磷酸腺苷、黃芩苷和甘草酸含量的方法，其特征在于：步驟(3)中按照如下色譜條件進行測定：色譜柱：Zorbax?TC-C₁₈柱(5μm，150mm×4.6mm)，流動相：甲醇(A)：0.01MKH₂PO₄(B)(10：90)(0min)—A：B(10：90)(12min)—A：B(70：30)(17min)—A：B(10：90)(30min)；檢測波長：250nm；流速：1.0mL/min；進樣量：50μL；柱溫：30℃。