[發(fā)明專(zhuān)利]具有益生作用的短小芽孢桿菌315及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410469105.1
• 申請(qǐng)日: 2014-09-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104263683B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 刁其玉;張乃鋒;祁敏麗
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;A61K35/742;A61P31/04;A23K10/18;C12R1/07
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物學(xué)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種具有益生作用的短小芽孢桿菌315及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著我國(guó)畜牧業(yè)的快速發(fā)展，其數(shù)量與質(zhì)量、生產(chǎn)與環(huán)境以及效益與資源之間的矛盾越來(lái)越突出。尤其是畜禽排泄物對(duì)環(huán)境造成的污染日趨嚴(yán)重，大量的有害物排放使得畜禽場(chǎng)污染物中的BOD(生化需氧量)和COD(化學(xué)需氧量)值急劇上升，同時(shí)也成為一些疾病發(fā)生和傳播的潛在誘因。

另一方面，食品安全問(wèn)題正引起越來(lái)越多的關(guān)注，在造成食品安全問(wèn)題的諸多原因中，重要原因之一是飼料中使用抗生素作為促生長(zhǎng)劑。客觀上，抗生素自20世紀(jì)50年代以來(lái)廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖業(yè)，在促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，保證動(dòng)物健康，節(jié)約飼料成本，提高經(jīng)濟(jì)效益等方面做出了巨大貢獻(xiàn)。但由于抗生素在動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)中的長(zhǎng)期使用，近些年來(lái)，由其所致的毒副作用和藥物殘留問(wèn)題已引起人們的關(guān)注。2006年，歐盟已經(jīng)全面禁止了飼料中抗生素的使用，美國(guó)和日本等國(guó)家也對(duì)其做出了嚴(yán)格的限制。2011年，韓國(guó)全國(guó)禁止在動(dòng)物飼料中添加抗生素。

隨著人們對(duì)畜產(chǎn)品安全和環(huán)境保護(hù)意識(shí)的不斷加強(qiáng)，作為抗生素的替代品，益生菌越來(lái)越多的應(yīng)用于動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)和飼料中。益生菌是一類(lèi)能改善動(dòng)物胃腸道微生態(tài)平衡，有益于動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能發(fā)揮的微生物添加劑。其主要作用效果體現(xiàn)在改善動(dòng)物新陳代謝，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收和利用，提高免疫力，減少環(huán)境污染等方面發(fā)揮重要作用。

由于芽孢桿菌對(duì)干燥、高溫、高壓、氧化等不良環(huán)境抵抗力很強(qiáng)，這種穩(wěn)定性增加了它作為益生菌的潛力。因此，獲得新型具有益生特性的芽孢桿菌的研究具有重大意義。分離和篩選抗病原菌且具有益生效果的短小芽孢桿菌，可以更好的應(yīng)用于飼料添加劑，以代替抗生素。但短小芽孢桿菌作為益生菌制劑或飼料添加劑的研究與應(yīng)用較少，尤其是在替代飼養(yǎng)抗生素和減少環(huán)境污染等方面。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有益生作用的短小芽孢桿菌315及其在動(dòng)物飼料中的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明的短小芽孢桿菌315(Bacillus pumilus)是從養(yǎng)豬場(chǎng)附近土壤中篩選到的一株芽孢桿菌。經(jīng)16S rRNA基因序列分析和體外益生效果評(píng)價(jià)，該菌株為能夠抑制病原菌且具有益生和減少畜禽養(yǎng)殖環(huán)境污染效果的短小芽孢桿菌，其16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。該菌株已于2014年3月3日保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(簡(jiǎn)稱(chēng)CGMCC，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，分類(lèi)命名為短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)，保藏號(hào)為CGMCC No.8878。

短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)315的微生物學(xué)特性為：革蘭氏陽(yáng)性菌，無(wú)鞭毛和莢膜；菌體表面干燥，有褶皺，不透明，灰白色；需氧菌；可利用蛋白質(zhì)、多種糖及淀粉。

本發(fā)明提供含有該短小芽孢桿菌315的菌劑。

本發(fā)明還提供短小芽孢桿菌315或上述菌劑在廣譜抗菌中的應(yīng)用。其中，短小芽孢桿菌315的抑菌譜包括革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌；所述革蘭氏陽(yáng)性菌為金黃色葡萄球菌，如Staphylococcus aureus IVDC C56005(中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心)；所述革蘭氏陰性菌為致病性大腸桿菌，如K88(Escherichia coli IVDC C83901)，鼠傷寒沙門(mén)氏菌，如Salmonella typhimurium IVDC C79-13(中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心)。

本發(fā)明還提供一種含有該短小芽孢桿菌315的動(dòng)物飼料添加劑。該飼料添加劑含有短小芽孢桿菌315的活菌數(shù)為1×10⁹CFU/g～1×10¹⁰CFU/g；優(yōu)選地，含有短小芽孢桿菌315的添加劑的活菌數(shù)為5×10⁹CFU/g。

本發(fā)明還提供一種含有該具有益生作用的短小芽孢桿菌315飼料添加劑的動(dòng)物飼料。其中，所述動(dòng)物飼料中短小芽孢桿菌315飼料添加劑的添加量為質(zhì)量百分比的1‰。因此，動(dòng)物飼料中短小芽孢桿菌315的活菌數(shù)為1×10⁹CFU/kg～5×10⁹CFU/kg，優(yōu)選5×10⁹CFU/kg。

本發(fā)明通過(guò)體外法鑒定了短小芽孢桿菌315的益生效果，結(jié)果表明，短小芽孢桿菌315能夠耐酸、酸膽鹽，能抵抗胃腸道的內(nèi)環(huán)境，具備益生菌的潛力。