[發明專利]一種紫蘇總黃酮的制備方法

在審

• 申請號: 201410450520.2
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN104173438A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 蘇劉花;楊存
• 申請（專利權）人: 南京澤朗生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/535
• 分類號: A61K36/535;A61K127/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明涉及一種紫蘇總黃酮的制備方法，屬于中藥有效成分提取領域。

背景技術

紫蘇葉為唇形科植物紫蘇的葉，又稱蘇葉，為一年生草本植物。其含有多種化學成分，如花色素苷、黃酮、黃酮苷等16種黃酮類化合物，以及迷迭香酸、紫蘇醛、紫蘇酮、欖香素、石竹烯等。

黃酮類化合物是指基本母核為2-苯基色原酮的系列化合物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分，種類繁多，具有多種生物活性，除具有抗菌、消炎、抗病變、降壓、清熱解毒、鎮靜、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有顯著效果，是一種重要的具有開發前景的天然有機抗氧化劑。近年來黃酮類化合物的研究傾向于其藥用價值的開發，更多地涉及提取工藝的應用研究、黃酮類化合物的含量測定及制劑制備。

目前國內外黃酮的提取、純化方法主要有：回流提取法、超臨界流體萃取法、聚酰胺柱層析法等。這些方法均存在諸多不足：回流提取法，具有耗時長、有效成分提取率低、操作復雜的缺點；超臨界流體萃取法雖然具有無溶劑殘留、提取率高、環保等優點，但其提取條件苛刻，設備昂貴，維修困難，不適合工業化生產；而聚酰胺純化法對黃酮類成分的不可逆吸附值高，其得率低，且洗脫麻煩。

發明內容

本發明是針對現有技術的不足，旨在提供一種高效性和選擇性、操作簡便、產率高、副產物少、可工業化實現的制備紫蘇總黃酮的方法。

本發明的技術方案按照下列步驟進行：

a.將紫蘇葉陰干，粉碎；

b.向上述原料中加入原料重量1~2%的復合酶，混合均勻，噴灑蒸餾水，達到手握成團即可，薄膜包裹，于30~40℃發酵3~5天；

c.取出，加入3~5倍的50~70%的乙醇溶液，進行微波萃取，于功率400~600W的條件下萃取20~40min，過濾，濾液減壓濃縮，回收乙醇，得濃縮液；

d.將所得濃縮液上大孔樹脂柱，經4~6倍樹脂體積的60~70%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮。

步驟b中所述的復合酶為比例0.5:0.3:0.2的纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶的混合物。

步驟d中所述的樹脂用量與原料的質量比為1:1。

步驟d中所述的大孔樹脂類型為HPD-100、HPD-400、AB-8。

黃酮類化合物是胞內物質，選用復合酶來分解構成細胞壁和細胞質的纖維素、半纖維素和果膠質，使其細胞壁水解破裂，從而增大了有效成分的擴散面積，有利于細胞內物質的溶出。而微波是一種超高速電磁波，具有很強的穿透作用，使植物細胞中的水分或有機溶劑迅速升溫升壓，細胞壁穿孔，使成分從細胞中溶出，以增加紫蘇中有效成分在溶劑中的溶解，而且微波電磁場使分子運動短時間內加劇，從而縮短了時間，提高了提取率。本發明利用酶法和微波提取兩種技術聯用，優勢互補，大大地提高了紫蘇總黃酮的提取率，再結合大孔吸附樹脂的純化技術，即可得到高得率、高含量的紫蘇總黃酮。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量1%的復合酶（纖維素酶：半纖維素酶：果膠酶=0.5:0.3:0.2），混合均勻，噴灑蒸餾水，達到手握成團即可，薄膜包裹，于30℃發酵3天。取出，加入3倍的50%的乙醇溶液，進行微波萃取，于功率400W的條件下萃取20min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質量的HPD-100大孔樹脂柱，經4倍樹脂體積的60%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為80.1%，經UV檢測，總黃酮的含量為70.6%。

實施例2：

將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量2%的復合酶（纖維素酶：半纖維素酶：果膠酶=0.5:0.3:0.2），混合均勻，噴灑蒸餾水，達到手握成團即可，薄膜包裹，于40℃發酵4天。取出，加入4倍的60%的乙醇溶液，進行微波萃取，于功率500W的條件下萃取30min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質量的AB-8大孔樹脂柱，經5倍樹脂體積的70%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為85.2%，經UV檢測，總黃酮的含量為75.4%。

實施例3：

將紫蘇葉陰干，粉碎，加入原料重量1.5%的復合酶（纖維素酶：半纖維素酶：果膠酶=0.5:0.3:0.2），混合均勻，噴灑蒸餾水，達到手握成團即可，薄膜包裹，于35℃發酵5天。取出，加入5倍的70%的乙醇溶液，進行微波萃取，于功率600W的條件下萃取40min，萃取液減壓濃縮，回收乙醇，將所得濃縮液加入與原料等質量的HPD-400大孔樹脂上柱，經6倍樹脂體積的65%的洗脫，收集洗脫液，濃縮、干燥，獲得紫蘇總黃酮，提取率為83.1%，經UV檢測，總黃酮的含量為75.2%。