[發明專利]一種神經肽及其編碼基因與應用

在審

• 申請號: 201410448514.3
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104250296A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發明（設計）人: 趙章武;岳臻
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/113;A01K67/033;A23K1/16
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

技術領域

本發明涉及一種神經肽及其編碼基因與應用，屬于生物技術領域。

背景技術

亞洲玉米螟俗名鉆心蟲，成蟲屬鱗翅目螟蛾科，是我國玉米生產中的主要害蟲，該蟲不僅取食玉米葉片、蛀入玉米主莖或果穗內，降低光合作用，影響養分運輸，還產生各種次級病害，致使玉米減產降質。近年來，隨著氣候條件的變化、耕作制度的改變、玉米種植密度的加大、肥水條件的提高，玉米螟的危害日益加重。

神經肽NPY(Neuropeptide?Y)首先在高等動物中發現，之后相繼在無脊椎動物中發現，在昆蟲中的發現相對較晚。由于最早發現的Neuropeptide?Y成熟肽C-末端為酪氨酸(Y)而被命名NPY，無脊椎動物中以苯丙氨酸(F)結尾，所以將無脊椎動物此類神經肽統稱為NPF或無脊椎動物的NPY家族。目前在昆蟲中NPY命名尚未統一，以酪氨酸結尾的稱NPY(如意大利蜜蜂)，以苯丙氨酸結尾的稱NPF(如果蠅)，昆蟲NPF或者NPY總稱NPY類神經肽。目前，昆蟲其他目的物種中，僅發現有NPF或者NPY，而在鱗翅目昆蟲中發現同時含有NPF和NPY。該類基因主要分布于腦和中腸中，在取食、酒精過敏、性行為、學習和記憶、生物節律等許多方面都起著重要的調控作用。

目前，在無脊椎動物中，對NPF基因功能的研究相對滯后，主要集中在果蠅和線蟲的NPF上。在鱗翅目昆蟲中的研究較少，從煙蛾夜和棉鈴蟲腦組織中分別克隆出NPY家族基因，發現其中不僅含有無脊椎動物特有的NPF神經肽，而且同時發現了類似脊椎動物的神經肽NPY。對神經肽的研究對于害蟲防治新技術的開發具有廣泛的前景。

發明內容

本發明的目的是提供一種神經肽及其編碼基因與應用。

本發明提供一種蛋白，為如下(1)-(4)任一所示：

(1)SEQ?ID?No.4所示的蛋白；

(2)將SEQ?ID?No.4所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白質；

(3)SEQ?ID?No.5所示的蛋白；

(4)將SEQ?ID?No.5所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白質。

上述蛋白的編碼基因也屬于本發明的保護范圍。

上述編碼基因中，所述編碼基因為如下中至少一種：

1)SEQ?ID?No.3中自5’末端起第28位至第393位核苷酸所示的DNA分子；

2)在嚴格條件下與1)限定的DNA分子雜交且編碼所述蛋白質的DNA分子；

3)與1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且編碼所述蛋白質的DNA分子。

含有上述任一所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌也屬于本發明的保護范圍。

一種抑制動物生長和/或抑制動物攝食的方法也屬于本發明的保護范圍，是抑制動物體內上述任一所述編碼基因的表達。

上述方法中，所述抑制動物體內上述任一所述編碼基因的表達的方法為將SEQ?ID?No.9所示的dsRNA分子導入所述動物體內。

上述任一所述的方法中，所述dsRNA分子導入所述動物體內的方法為如下(1)或(2)所述的任一種方法：

(1)將所述dsRNA通過注射的方法導入所述動物體內；

(2)將所述dsRNA通過飼喂的方法導入所述動物體內；

所述dsRNA導入所述動物體內后，dsRNA在細胞內RNA解旋酶的作用下解鏈成正義鏈和反義鏈；所述反義鏈與動物體內的蛋白結合形成RNA誘導沉默復合物，即RISC；RISC與目的編碼基因表達的mRNA的同源區進行特異性結合，抑制目的編碼基因的表達。

一種促進動物生長和/或促進動物攝食的方法也屬于本發明的保護范圍，是使上述任一所述的編碼基因在動物中過表達。

上述任一所述的方法中，所述動物為昆蟲，具體為鱗翅目昆蟲，再具體為亞洲玉米螟；

所述生長為體重增加和/或體長增長。

一種dsRNA分子也屬于本發明的保護范圍，該分子的序列如SEQ?ID?No.9所示。

抑制上述任一所述編碼基因表達的抑制劑在制備抑制動物生長和/或抑制動物攝食的產品中的應用也屬于本發明的保護范圍；

所述抑制劑具體為上述dsRNA分子；

或，

上述蛋白、上述任一所述的編碼基因在制備促進動物生長和/或促進動物攝食的產品中的應用也屬于本發明的保護范圍；