[發(fā)明專利]IL-10多肽抑制劑

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410441333.8
• 申請(qǐng)日: 2014-09-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104231054A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉曉松;王天放;王躍建
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 王躍建;王天放;劉曉松
• 主分類號(hào): C07K7/08
• 分類號(hào): C07K7/08;C07K1/04;C12N15/11;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/10;A61P37/04
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202
• 代理人: 程躍華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種多肽及其制備方法，本發(fā)明還涉及這種多肽在制藥領(lǐng)域的應(yīng)用，尤其是利用這種多肽具有抑制白細(xì)胞介素－10的功能，在制備預(yù)防或治療疾病時(shí)，阻斷白介素10藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

白細(xì)胞介素－10(IL-10)是一個(gè)在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)中具有多向性作用的細(xì)胞因子，其功能包括了截然相反的兩個(gè)方面，免疫抑制和免疫促進(jìn)。IL-10蛋白是二聚體，每個(gè)亞單位的長(zhǎng)度為178個(gè)氨基酸。由很多免疫細(xì)胞分泌，包括TH1，TH2和TH17亞類，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(TReg)，CD8+T和B細(xì)胞。也在啟動(dòng)免疫反應(yīng)的細(xì)胞中表達(dá)，包括樹(shù)突狀細(xì)胞(DCs)、巨噬細(xì)胞、漿細(xì)胞、NK細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等，IL-10通過(guò)抑制病原體的免疫反應(yīng)來(lái)防止對(duì)宿主的損害。

當(dāng)IL-10在免疫反應(yīng)啟動(dòng)階段出現(xiàn)時(shí)可中止T細(xì)胞的反應(yīng)，能抑制現(xiàn)有T細(xì)胞抗病毒感染的能力。而且IL-10可直接作用于T細(xì)胞，限制其復(fù)制、功能分化和效能。在慢性病毒感染和癌癥患者血清中常發(fā)現(xiàn)IL-10非常過(guò)量的表達(dá)，使針對(duì)慢性病毒感染，腫瘤免疫反應(yīng)消失而引起嚴(yán)重后果而在丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、免疫缺陷病毒(HIV)和EB病毒(EBV)感染中低水平的IL-10常與病毒的清除和病毒的有效控制存在相關(guān)性。

IL-10還與體內(nèi)自身免疫相關(guān)。自身免疫由靶向正常組織的自身抗體、自身反應(yīng)性T細(xì)胞或它們的某些組合的發(fā)展引起。自身免疫性疾病的一個(gè)實(shí)例是全身紅斑狼瘡(SLE)，一種全身的結(jié)締組織都成為炎性的慢性風(fēng)濕性疾病；自身抗體將正常的身體組織誤認(rèn)為是外部侵入的物質(zhì)，攻擊正常的身體組織，引起特征性的炎癥，其中一些是有腎臟病毒性的；SLE在女性中的發(fā)病率高于男性十倍，它可以在任何年齡段發(fā)作，但最常見(jiàn)的是在年輕成年人中。體內(nèi)和體外研究都表明，阻斷IL-10產(chǎn)生可以減輕SLE的臨床表現(xiàn)【參見(jiàn)，Gonzalez-Amaro等，J.Autoimmunity?11：395-402(1998)】。

治療性地阻斷IL-10信號(hào)來(lái)增加抗病毒免疫和疫苗效果在抗病毒治療中越來(lái)越有前景。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，阻斷白介素10，可以清除慢性病毒感染，如果在DNA疫苗免疫時(shí)阻斷白介素10，可以更好地清除慢性病毒感染。卡介苗免疫時(shí)阻斷白介素10，可以誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生更強(qiáng)的T細(xì)胞免疫反應(yīng)，比僅僅使用卡介苗免疫，可以更好地保護(hù)免疫動(dòng)物免受結(jié)核菌感染。此外，腫瘤組織局部注射Toll樣受體9配體CpG，腹腔注射抗白介素10受體抗體，可以抑制腫瘤生長(zhǎng)；病毒樣顆粒免疫時(shí)阻斷白介素10，可以提高病毒樣顆粒疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞免疫反應(yīng)。疫苗多肽疫苗結(jié)合Toll樣受體4配體脂多糖LPS免疫時(shí)阻斷IL-10信號(hào)，也可以抑制人乳頭瘤病毒E7抗原轉(zhuǎn)化的TC-1腫瘤細(xì)胞在小鼠中的生長(zhǎng)。免疫時(shí)阻斷白介素10提高疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞反應(yīng)，清除病毒感染，抑制腫瘤生長(zhǎng)的可能機(jī)理是，阻斷了白介素10對(duì)抗原提呈細(xì)胞、特別是樹(shù)突狀細(xì)胞的抑制作用。

IL-10受體是由IL-10R1和IL-10R2亞單位組成的二類細(xì)胞因子家庭成員，IL-10R1是唯一的配體連接亞單位。IL-10R2是信號(hào)傳導(dǎo)的亞單位，與其他細(xì)胞因子(IL-22，IL-26，IL-28和IL-29)所共有。因此最近認(rèn)為使用特定的分子、抗IL-10或抗IL-10受體的抗體來(lái)阻斷IL-10R1與IL-10結(jié)合是解決這個(gè)問(wèn)題的可行方法。美國(guó)先靈公司申請(qǐng)的200480040148.2及其兩份分案申請(qǐng)201010004581.8、201010004582.2均涉及白細(xì)胞介素-10抗體。但臨床使用級(jí)的抗體(如單克隆抗體)由于高成本生產(chǎn)和復(fù)雜的管理批準(zhǔn)程序等原因尚未投入臨床使用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了提高一種與IL-10配體連接亞單位IL-10R1易于結(jié)合、從而據(jù)此機(jī)制來(lái)抑制IL-10生物學(xué)功能的多肽。

本發(fā)明還公開(kāi)了這種多肽的制備方法。

本發(fā)明還公開(kāi)了這種多肽在制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。