[發(fā)明專利]一種二氧化錳納米佐劑及其制備方法、應用

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• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107456575A
• 公開（公告）日: 2017-12-12
• 發(fā)明（設計）人: 劉莊;許利耕;陳倩;彭睿
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 常亮

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術與疫苗技術領域，具體涉及一種二氧化錳納米材料及其制備方法、應用，尤其涉及一種二氧化錳納米佐劑及其制備方法、應用。

背景技術

疫苗是將病原微生物(如細菌、立克次氏體、病毒等)及其代謝產物，經過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的免疫制劑。疫苗保留了病原體刺激機體免疫系統(tǒng)的特性。當動物體接觸到這種不具傷害力的病原體后，免疫系統(tǒng)便會產生一定的保護物質，如細胞因子、活性生理物質、特殊抗體等；當機體再次接觸到這種病原體時，免疫系統(tǒng)便會依循其原有的記憶，制造更多的保護物質來阻止病原體的傷害。自問世以來，疫苗在保護人類健康方面發(fā)揮了巨大作用。然而，目前針對一些重大疾病尤其是傳染性疾病如艾滋病、瘧疾等以及惡性腫瘤的疫苗則尚未研發(fā)出來。疫苗主要由抗原(多為蛋白質抗原或多肽)和免疫佐劑組成。因此，有效提高抗原的免疫原性和佐劑的免疫激活作用是疫苗研發(fā)的兩個主要策略。

目前，憑借其獨特的理化性質，納米材料作為載體在提高抗原免疫原性方面已顯示出良好的應用前景。迄今為止，絕大部分納米材料主要通過包裹、共價連接或靜電吸附等攜帶抗原，促進免疫細胞對抗原的攝入。然而，這些材料的抗原載帶能力尚不理想，難以有效提高抗原的免疫原性。

作為臨床唯一批準使用的疫苗佐劑，鋁佐劑可有效促進抗原誘導體液免疫反應，但難以誘導細胞免疫反應，這對于清除內源性病原體如艾滋病毒以及腫瘤細胞顯然是不行的。同時，鋁佐劑具有一定副作用，可引起注射部位的炎癥和過敏反應。

因此，如何開發(fā)一種更合適、更安全的新型疫苗佐劑成為疫苗研發(fā)領域的關鍵策略，也是領域內諸多具有前瞻性的研究人員廣為關注的焦點之一。

發(fā)明內容

有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術問題在于提供一種二氧化錳納米材料及其制備方法、應用，特別是一種二氧化錳納米佐劑及其制備方法、應用，本發(fā)明提供的二氧化錳納米材料，可有效促進蛋白質抗原的免疫原性，以及寡聚核苷酸CpG的免疫刺激活性，同時可降解，而且制備方法簡單易行，適用于大規(guī)模生產應用。

本發(fā)明提供了一種二氧化錳納米材料，包括二氧化錳納米顆粒以及復合在所述二氧化錳納米顆粒表面被載物質；

所述被載物質包括CpG寡聚核苷酸和/或抗原；

所述抗原包括蛋白質抗原和/或多肽抗原。

優(yōu)選的，所述二氧化錳納米材料的粒徑為15～100nm。

優(yōu)選的，所述二氧化錳與所述CpG寡聚核苷酸的摩爾比為0.8：(0.006～0.02)。

優(yōu)選的，所述二氧化錳與所述蛋白質抗原的摩爾比為0.8：(0.02～0.06)；

所述二氧化錳與所述多肽抗原的摩爾比為0.8：(0.06～0.2)。

優(yōu)選的，所述抗原包括艾滋病毒抗原、結核桿菌抗原、瘧疾抗原、人乳頭狀瘤病毒抗原和腫瘤相關抗原中的一種或多種。

本發(fā)明提供了一種二氧化錳納米材料的制備方法，包括以下步驟：

A)將氯化錳溶液和被載物質溶液進行混合后，孵育得到復合物；

所述被載物質包括CpG寡聚核苷酸和/或抗原；所述抗原包括蛋白質抗原和/或多肽抗原；

B)將上述步驟得到的復合物與氫氧化鈉溶液進行反應后，得到二氧化錳納米材料。

優(yōu)選的，所述氯化錳與所述CpG寡聚核苷酸的摩爾比為1：(0.006～0.02)；

所述氯化錳與所述蛋白質抗原的摩爾比為1：(0.02～0.06)；

所述氯化錳與所述多肽抗原的摩爾比為1：(0.06～0.2)；

所述氯化錳與所述氫氧化鈉的摩爾比為1：(8～32)。

優(yōu)選的，所述氯化錳溶液的濃度為80～200μg/mL；

所述CpG寡聚核苷酸溶液的濃度為20～60μg/mL；

所述蛋白質抗原溶液的濃度為650～1500μg/mL；

所述多肽抗原溶液的濃度為90～200μg/mL；

所述氫氧化鈉溶液的濃度為300～800μg/mL。

優(yōu)選的，所述孵育的時間為15～30分鐘；

所述反應的時間為1～3小時。

上述技術方案任意一項所述的二氧化錳納米材料或上述技術方案任意一項所制備的二氧化錳納米材料在疫苗領域的應用。