[發(fā)明專利]一種從發(fā)酵液中提取他克莫司的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410435044.7
• 申請日: 2014-08-30
• 公開（公告）號: CN105367586A
• 公開（公告）日: 2016-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 呂施勇;陶云國;梁昌海;潘劍
• 申請（專利權(quán)）人: 海正藥業(yè)（杭州）有限公司
• 主分類號: C07D498/18
• 分類號: C07D498/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種從發(fā)酵液中提取他克莫司的方法，更尤其，本發(fā)明涉及一種結(jié)合使用陶瓷膜、納濾膜并結(jié)合使用有機溶劑將發(fā)酵液中的他克莫司以異常高的收率提取出來的方法。

背景技術(shù)

他克莫司（Tacrolimus）又名FK506，是從鏈霉菌屬（streptomycestsukubaensis）中分離出來的發(fā)酵產(chǎn)物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于23元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。為一種強力的新型免疫抑制劑，近年來已成為肝、腎移植的一線用藥，也在自身免疫性疾病中發(fā)揮著積極作用。

目前從發(fā)酵液中提取他克莫司的方法基本是（1）用板框壓濾機或離心機實現(xiàn)菌絲體和水相的分離，用有機溶劑浸泡菌絲體提取脂溶性目標(biāo)組分。上述方法的缺點是部分游離在水相中的脂溶性目標(biāo)組分在菌絲體和水相分離時隨水相進入廢水中；操作對環(huán)境不友好，有機溶劑耗用量大；因菌絲體中成分復(fù)雜，在有機溶劑提取過程中易造成大量乳化，進而影響收率和質(zhì)量；板框的裝拆、濾餅出料和濾布的清洗都為手工操作，并且輔助時間長，勞動強度大，生產(chǎn)效率低，從而影響整個生產(chǎn)的進度，與環(huán)保要求的符合度較低。（2）用有機溶劑直接在發(fā)酵液中浸提他克莫司。上述方法的缺點是溶劑耗用量大，易乳化，質(zhì)量和收率不穩(wěn)定。

現(xiàn)代膜分離技術(shù)起源于20世紀(jì)60年代，是一種新型的流體分離單元操作技術(shù)。它以高分子分離膜為分離介質(zhì)，以壓力差、濃度差、電位差等為傳質(zhì)驅(qū)動力，將待分離流體中的不同物質(zhì)按照分子量、顆粒或電荷的不同進行分離。由于膜分離技術(shù)具有高效節(jié)能等特點，自第一套工業(yè)化設(shè)備推向市場以來，得到了迅猛發(fā)展，目前已遍及幾乎所有工業(yè)領(lǐng)域。按照膜分離的不同原理，可以把膜分成過微濾膜、超濾膜、納濾膜、反滲透膜、透析膜、電滲析膜、滲透汽化膜以及氣體分離膜等不同種類。

陶瓷膜是微濾膜中的一種，主要由Al₂O₃，ZrO₂，TiO₂和SiO₂等無機材料制備的多孔膜，其孔徑為1－200nm。具有化學(xué)穩(wěn)定性好，能耐酸、耐堿、耐有機溶劑；機械強度大，可反向沖洗；抗微生物能力強，耐高溫，孔徑分布窄，分離效率高等特點，在食品工業(yè)、生物工程、環(huán)境工程、化學(xué)工業(yè)、石油化工、治金工業(yè)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。

陶瓷膜過濾是溶有有效成分的浸提液不停的向透出側(cè)透出的過程，與傳統(tǒng)的將固液分離過濾模式不同，因而整個過濾過程都不需要添加助濾劑。

納濾膜是允許溶劑分子或某些低分子量溶質(zhì)或低價離子透過的一種功能性的半透膜，它截留有機物的分子量大約為150－500左右，被用于去除地表水的有機物和色度，脫除地下水的硬度，部分去除溶解性鹽，濃縮果汁以及分離藥品中的有用物質(zhì)等。

中國專利CN1297475公開了一種用陶瓷膜從發(fā)酵液中分離水溶性產(chǎn)物的方法；中國專利CN1699358公開了一種用陶瓷膜分離茶黃素的方法；中國專利CN1775729公開了一種用陶瓷膜提取高純的檸檬酸的方法；中國專利CN101565395公開了一種用陶瓷膜提取L-色氨酸的方法，上述專利都是用陶瓷膜來過濾分離水溶性的目標(biāo)產(chǎn)物，目前還沒有發(fā)現(xiàn)用陶瓷膜來過濾收集脂溶性成分的專利和報道，更未發(fā)現(xiàn)用陶瓷膜和納濾膜結(jié)合分離他克莫司的專利和報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明致力于提供一種更簡單有效、環(huán)保、成本低的用于從發(fā)酵液中以高收率提取他克莫司的方法，即使發(fā)酵液的質(zhì)量很差。

用于從發(fā)酵液中提取他克莫司的本發(fā)明的方法包括：

a）用陶瓷膜濃縮發(fā)酵液，接著

b）向發(fā)酵液濃縮液中持續(xù)加入一種或數(shù)種選自醇、二醇、酮、酯類、羧酸類有機溶劑或上述溶劑與水的混合物并使用陶瓷膜浸提后得他克莫司浸提液，接著

c）用納濾膜濃縮他克莫司浸提液得他克莫司納濾濃縮液。

本發(fā)明本發(fā)明涉及一種從發(fā)酵液中提取他克莫司的方法，更尤其，本發(fā)明涉及一種結(jié)合使用陶瓷膜、納濾膜等設(shè)備，用有機溶劑將發(fā)酵液中的他克莫司以異常高的收率提取出來的方法。

總的來說，從發(fā)酵液中提取他克莫司的方法包括用陶瓷膜濃縮發(fā)酵液，向發(fā)酵液濃縮液中持續(xù)加入一種或數(shù)種選自醇、二醇、酮、酯類、羧酸類有機溶劑或上述溶劑與水的混合物并使用陶瓷膜浸提后得他克莫司浸提液，用納濾膜濃縮浸提液。

陶瓷膜濃縮過程中可向發(fā)酵液中加入水、表面活性劑、酸、堿、有機溶劑與水的混合物或者改變發(fā)酵液溫度以改變發(fā)酵液性質(zhì)。