[發明專利]一種高危型人乳頭瘤病毒檢測及分型方法

有效

• 申請號: 201410431874.2
• 申請日: 2014-08-28
• 公開（公告）號: CN105368982B
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 華紹炳;胡杰鋒;竺旭峰;壽瑩佳;李德強;魏栓林;韓斌
• 申請（專利權）人: 杭州德同生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6804
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

本發明涉及一種高危型人乳頭瘤病毒檢測及分型方法。本發明揭示了對于14種HPV高危型病毒具有特異性檢測功能的探針，并基于核酸雜交化學發光免疫技術，開發了可實現對高危型人乳頭瘤病毒(HPV)DNA進行檢測和分型的技術。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，更具體地，本發明涉及一種基于核酸雜交化學發光免疫技術的HPV DNA分型檢測技術及應用。

背景技術

人乳頭瘤病毒(Human papillomaviruses，簡稱HPV)是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬的二十面體DNA病毒。HPV的基因組是包含約8000個堿基對的雙鏈環狀DNA，全部的開放閱讀框(ORFs)均有一條DNA鏈編碼。HPV根據基因組核酸序列的同源性小于90％被分為不同的型別，在同一型內病毒基因組核酸序列差異在2-10％被視為不同的亞型，而在同一亞型內，病毒基因組核酸序列差異小于2％，則稱為該亞型的變異株。到目前為止，研究人員發現有近百種HPV型別。不同的型別引起不同的臨床表現，根據侵犯的組織部位不同可分為：皮膚型和黏膜型。皮膚型包括與尋常疣、扁平疣、跖疣等相關的HPV1、2、3、4、7、10、12、15等，也包括與疣狀表皮發育不良有關的HPV5、8、14、17、20、36、38等；黏膜型包括與生殖器、肛門、口咽部、食道黏膜等感染相關的HPV6、11、13、32、34、40、42、43、44、53、54等，也包括與子宮頸癌、直腸癌、口腔癌、扁桃體癌等相關的HPV16、18、30、31、33、35、39等(Jenson AB et al.1984，Human papillomavirus.In:Belshe RB，editor.Textbook ofHuman Virology.Littleton，MA:PSG-Wright；p951-68)。根據HPV對人腫瘤的發生危害性，HPV可分為“高危型”和“低危型”HPV。低危型HPV，比如HPV6，11，42，53等與生殖器、肛門、口咽部、食道黏膜等感染相關，高危型HPV是引起宮頸癌等的主要原因。

德國著名醫學科學家Harald zur Hausen早在上世紀70年代研究發現高危型HPV感染是宮頸癌的成因(zur Hausen H.1977，Human papillomaviruses and theirpossible role in squamous cell carcinomas.Curr.Top.Microbiol.Immunol.，78:1-30)，他通過研究證實了兩者間的直接關聯性，并因此榮獲2008年度諾貝爾生理學和醫學獎。據中國醫學科學院腫瘤醫院腫瘤研究所我國著名腫瘤流行病專家喬友林教授及其科研團隊對中國的腫瘤流行病調查研究發現，中國宮頸疾病(≥CIN2)與HPV感染的相關性達96-100％(Jing Li et al.2013，Epidemiological Features of Human Papillomavirus(HPV)Infection among Women Living in Mainland China.Asian Pac J Cancer Prev，14(7):4015-4023)。自1995年國際癌癥協會(IARC)專題討論會認為HPV感染是宮頸癌的主要病因，HPV的持續感染已被認為是宮頸癌發病的必要因素和最主要病因。大量研究表明，多數宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)和幾乎所有的宮頸癌病變中都存在高危型HPV感染(Remmink AJ et al.1995，The presence of persistenthigh-risk HPV genotypes in dysplastic cervical lesions is associated withprogressive disease:natural history up to 36 months.Int J Cancer，61(3):306-11)。值得注意的是，宮頸癌的發病一般需要經歷從HPV持續感染到不同程度的CIN(CIN1-CIN3)，最后發展成為宮頸癌(Bosch FX et al.2002，The causal relation betweenhuman papillomavirus and cervical cancer.J Clin Pathol，55(4):244-65)。這個過程一般比較漫長，平均需要10-15年時間，這為宮頸癌及其癌前病變的早期發現和阻斷提供了足夠的時間。