[發(fā)明專利]用于降解乙草胺的細(xì)菌、篩選方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410431225.2
• 申請(qǐng)日: 2014-08-27
• 公開（公告）號(hào): CN104232521B
• 公開（公告）日: 2017-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙建莊;李體文;魏朝俊;賈臨芳;吳昆明;鄭燕英;梁丹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京農(nóng)學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/02;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11371
• 代理人: 吳開磊

1.用于降解乙草胺的細(xì)菌，其特征在于，該細(xì)菌為YCA-1(Cupriavidus?oxalaticus)，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏編號(hào)為CGMCC?No.9127。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于降解乙草胺的細(xì)菌的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)、將供試泥樣置于含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)后得到第一混合菌液；

2)、將所述第一混合菌液接種到另一含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中，進(jìn)行傳代培養(yǎng)，得到第二混合菌液；

3)、將所述第二混合菌液涂布在含有乙草胺的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)至平板上長(zhǎng)出單菌落后分別收集，并利用LB培養(yǎng)基劃線純化，得到多個(gè)純化后的單菌落；

4)、將多個(gè)所述純化后的單菌落接種到含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中，得到多個(gè)單菌菌液；

5)、將多個(gè)所述單菌菌液分別利用含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基搖床培養(yǎng)后，分別測(cè)定基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中乙草胺的殘留濃度，并篩選出使得乙草胺濃度降低的單菌菌液，得到細(xì)菌YCA-1。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，在步驟1)、步驟2)、步驟4)和步驟5)中：

所述基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基，按照重量份數(shù)計(jì)，包括：

氯化鈉0.8-1.2份、磷酸二氫鈉1.2-1.8份、磷酸氫二鈉0.3-0.7份、硫酸鎂0.1-0.3份、硫酸亞鐵0.01-0.03份、氯化鈣0.02-0.06份、檸檬酸鈉0.3-0.7份、水1000份；

且在所述含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中，乙草胺含量為48-52mg/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的篩選方法，其特征在于，在步驟1)中：

所述供試泥樣取自乙草胺生產(chǎn)廠的廢水排水道；且所述供試泥樣與所述含有乙草胺的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基質(zhì)量比為1:20。

5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的篩選方法，其特征在于，在步驟1)中：

所述搖床培養(yǎng)的溫度為30℃、轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分鐘、時(shí)間為7天。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的篩選方法，其特征在于，在步驟2)中：

所述接種的接種量為5％。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選方法，其特征在于，在步驟3)中：

所述暗培養(yǎng)的溫度為30℃，時(shí)間為2天。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的篩選方法，其特征在于，在步驟3)中：

所述LB培養(yǎng)基，按照重量份數(shù)計(jì)，包括：

蛋白胨8-12份、酵母膏4-6份、氯化鈉8-12份、瓊脂18-22份、水1000份。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的篩選方法，其特征在于，在步驟5)中：

所述搖床培養(yǎng)的溫度為30℃、轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分鐘、時(shí)間為5-7天。

10.權(quán)利要求1所述的用于降解乙草胺的細(xì)菌在作為乙草胺降解劑的活性成分，并在降解乙草胺中的應(yīng)用。