[發明專利]一種檢測肺炎鏈球菌的LAMP引物組、試劑盒和方法

有效

• 申請號: 201410406124.X
• 申請日: 2014-08-18
• 公開（公告）號: CN104164508A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 郭旭光;夏勇;江鏡全;陳瓊;劉美玲;唐曉華
• 申請（專利權）人: 廣州醫科大學附屬第三醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/14;C12N15/11;C12R1/46
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;宋靜娜

1.一種檢測肺炎鏈球菌的LAMP引物組，其特征在于，包括以下引物：

外引物F3:GGCTCTACTGTGAATTCTGG；

外引物B3:GGCAACTGGTACTGGTTC；

內引物FIP:TATCCAGTCAGCGGACGGACTTGTCTGCCAGTGTTCC；

內引物BIP:

GCGCCTTCTTTAGCGTCTAAGTAACGAAGAAGGTGCCATG。

2.根據權利要求1所述的檢測肺炎鏈球菌的LAMP引物組，其特征在于，所述LAMP引物組還包括：

環引物FLP:ACAGGCTGGTACTACCTCA；

環引物BLP:GTACTTGACCCAGCCTGTC。

3.一種檢測肺炎鏈球菌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權利要求1或2所述的LAMP引物組。

4.根據權利要求3所述的檢測肺炎鏈球菌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括反應液、顯色劑、Bst大片斷DNA聚合酶、陽性對照品、陰性對照品和超純水；所述反應液包括Tris-HCl(PH8.8)、KCl、MgSO₄、(NH₄)₂SO₄、Tween20、甜菜堿以及dNTP。

5.根據權利要求4所述的檢測肺炎鏈球菌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中所述內引物FIP和BIP各1.6μM，所述外引物F3和B3各0.2μM，所述試劑盒中所述反應液包括20mM?Tris-HCl(PH8.8)、10mM?KCl、8mM?MgSO₄、10mM(NH₄)₂SO₄、0.1％Tween20、1M甜菜堿以及1.6mM?dNTP，所述試劑盒中所述Bst大片斷DNA聚合酶濃度為8U/μL；

或者所述試劑盒中所述內引物FIP和BIP各1.6μM，所述外引物F3和B3各0.2μM，所述環引物FLP和BLP各0.8μM，所述試劑盒中所述反應液包括20mM?Tris-HCl(PH8.8)、10mM?KCl、8mM?MgSO₄、10mM(NH₄)₂SO₄、0.1％Tween20、1M甜菜堿以及1.6mM?dNTP，所述試劑盒中所述Bst大片斷DNA聚合酶濃度為8U/μL。

6.根據權利要求4所述的檢測肺炎鏈球菌的試劑盒，其特征在于，所述熒光顯色劑為SYBR?Green?I，所述陽性對照品為30ng/μL的肺炎鏈球菌DNA，所述陰性對照品為ddH₂O。

7.一種檢測肺炎鏈球菌的方法，其特征在于，所述方法為采用如權利要求1或2所述的LAMP引物組檢測肺炎鏈球菌。