[發(fā)明專利]一種山羊精液玻璃化冷凍和解凍配方與方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410399002.2 | 申請日： | 2014-08-13 |
| 公開（公告）號： | CN104161037A | 公開（公告）日： | 2014-11-26 |
| 發(fā)明（設計）人： | 花衛(wèi)華;劉偉忠;孫偉;劉泉 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學研究所 |
| 主分類號： | A01N1/02 | 分類號： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246 | 代理人： | 龔燮英 |
| 地址： | 212400 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 山羊 精液 玻璃化 冷凍 解凍 配方 方法 | ||
1.一種山羊精液玻璃化冷凍配方，其特征在于：包括：1)基礎液：含20mg/ml牛血清白蛋白的MEM培養(yǎng)基；2)平衡液：基礎液添加20％乙二醇；3)玻璃化冷凍液：于基礎液中添加70％乙二醇、0.8mol/ml海藻糖、10％聚乙烯吡咯烷酮。
2.一種山羊精液玻璃化冷凍的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)用權(quán)利要求1所述的山羊精液玻璃化冷凍配方——基礎液、平衡液、玻璃化冷凍液在常溫下平衡；
(2)按照常規(guī)方法獲取羊精液，液化后進行CASA分析；
(3)將平衡液與等量的羊精液混合，平衡5～10分鐘；
(4)將等量的玻璃化冷凍液加入到混合液中；
(5)立即將混入了玻璃化冷凍液的精液裝入500μl冷凍脈管中；
(6)冷凍脈管投入液氮罐中保存；
(7)記錄本次冷凍結(jié)果，保存位置等信息。
3.一種山羊精液玻璃化解凍配方，其特征在于，包括解凍液1(TS1)：基礎液添加0.4mol/L海藻糖解凍；解凍液2(TS2)：基礎液。
4.一種山羊精液玻璃化解凍方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將權(quán)利要求3中的解凍液1和解凍液2常溫下平衡；
(2)冷凍脈管從液氮中取出，于37度水浴60sec；
(3)剪去脈管塞一端，從管中吹出冷凍精液到TS1中，300g混勻離心，去上清；
(4)沉淀用TS2稀釋到需要濃度，顯微鏡分析，備用。
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