[發明專利]多葉越南槐中總生物堿的提取方法、檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201410371787.2
• 申請日: 2014-07-31
• 公開（公告）號: CN104095907B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: 盧文杰;陳家源;陸國壽;譚曉;黃建猷;黃周鋒;何開家;李燕婧;鐘正賢
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中醫藥研究院
• 主分類號: A61K36/48
• 分類號: A61K36/48;A61P1/04;A61P7/02;A61P9/10;A61P3/06;G01N30/90
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 羅?？?/td>

技術領域

本發明屬于藥液提取技術領域，具體涉及一種多葉越南槐中總生物堿的提取方法、檢測方法及其應用。

背景技術

多葉越南槐Sophora?tonkinensis?Gagnep.var.polyphyllaS.?Z.Huang?et?Z.C.Zhou為豆科槐屬植物，與常用中藥材山豆根[學名：越南槐Sophora?tonkinensis?Gagnep]是同科同屬同種的根，是越南槐的一個變種。生長于石山區，分布于廣西、廣東、云南、貴州和江西等省，在廣西主要分布于紅水河流域，如都安、馬山、忻城、武鳴等地。其性寒，味苦，具有清熱解毒、消腫利咽之功效，常用于火毒蘊結，咽喉腫痛，齒齦腫痛，肺熱咳嗽，肝炎等疾患的治療。

有關多葉越南槐藥物成分目前有了一些研究：

1、盧文杰?、牙啟康在《廣西科學》2011年第四期發表了“多葉越南槐脂溶性成分研究”?的文章，采用索氏提取法提取多葉越南槐（Sophora?tonkinensis?Gagnep.var.polyphyllaS.Z.Huang?et?Z.C.Zhou）的脂溶性成分,甲酯化后,用氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）進行分析,計算機檢索結合人工解析進行成分分析和鑒定,共分離得到41個峰,鑒定了其中32種成分。多葉越南槐脂溶性成分主要含長鏈脂肪酸。所有成分均首次在該植物中鑒定。

2、盧文杰、陸國壽、譚曉、陳家源、黃周鋒在《中國實驗方劑學雜志》2014年第20卷第8期發表了“多葉越南槐生物堿類成分的研究”的文章，采用Sephadex?LH-20柱色譜、硅膠柱色譜、重結晶等方法分離和純化多葉越南槐的生物堿成分，綜合運用紅外光譜、質譜、核磁共振等技術和理化方法進行分析，并確定分離得到的生物堿結構。結果：根據理化性質及波譜數據，鑒定了各化合物的結構分別是：槐果堿，苦參堿，槐花醇，9α-羥基苦參堿，12α-羥基槐果堿，氧化槐果堿，氧化苦參堿，金雀花堿。結論：化合物1～8均為首次從多葉越南槐中分離得到。

多葉越南槐與山豆根具有相同的藥用功效，廣西民間常把多葉越南槐當作山豆根藥材來使用，《廣西中藥材標準，1990版》也將多葉越南槐作為山豆根藥材的植物來源之一收載。據分析，多葉越南槐與山豆根一樣含有苦參堿，槐果堿，槐花醇，9α–羥基苦參堿，12α-羥基槐果堿，氧化苦參堿，氧化槐果堿，金雀花堿等多種生物堿成分。目前市場上山豆根面臨日益枯竭的現狀，因此，對多葉越南槐中總生物堿進行提取開發，探索多葉越南槐藥材能否作為山豆根的代用品，為資源利用和臨床應用提供科學依據，顯得尤為重要。

發明內容

本發明的目的是針對目前市場山豆根資源逐漸減少的問題，提供一種多葉越南槐中總生物堿的提取方法、檢測方法及其應用，以此探索多葉越南槐藥材能否作為山豆根的代用品，為資源利用和臨床應用提供科學依據。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

本發明多葉越南槐中總生物堿的提取方法分為兩種：

第一種方法為：將多葉越南槐藥材用70-95%乙醇加熱回流提取得到流浸膏，經過加水混懸和調酸處理后用氯仿萃取，最終得到總生物堿。

具體步驟為：（1）將多葉越南槐藥材粉碎成20-80目粗粉，用70-95%乙醇在80-90℃下回流提取3-5次，每次1-3小時，趁熱過濾，回收溶劑，得60-70℃下相對密度為1.10-1.20的流浸膏；（2）將流浸膏加水混懸，滴加濃硫酸至pH值為3；（3）用氯仿萃取至氯仿顏色變淺，酸水層加碳酸鉀至pH值為11，用氯仿萃取至氯仿液蒸干無生物堿反應，回收氯仿得氯仿提取物，即得總生物堿。

第二種方法為：先將多葉越南槐藥材滲漉提取，經732陽離子交換樹脂洗脫提取，最后對樹脂進行氯仿洗脫處理得到總生物堿。

具體步驟為：（1）將多葉越南槐藥材粉碎成20-80目粗粉，用多葉越南槐藥材質量的8-20倍的1%鹽酸水溶液滲漉提取1-7天，收集滲漉液；（2）滲漉液通過預先處理好的732陽離子交換樹脂柱，用水洗脫樹脂柱至水液無色；（3）將樹脂倒入敞開的器皿中，晾干，用氨水捏溶，用氯仿回流提取2-5次，至氯仿提取液蒸干檢查無生物堿反應，回收氯仿提取液得氯仿提取物，即得總生物堿。