[發(fā)明專利]以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410335052.4
• 申請日: 2014-07-15
• 公開（公告）號: CN104101714A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王洪睿;郭磊;王梅林;曾濤玲;林琦
• 申請（專利權(quán)）人: 廈門大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/539;C12Q1/02
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務(wù)所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應(yīng)森

1.一種抑制E3泛素連接酶Smurf1泛素化降解其底物RhoB的檢測方法，其特征在于選自但不限于細胞分子生物學(xué)檢測方法或化學(xué)生物學(xué)檢測方法，所述細胞分子生物學(xué)檢測方法包括但不限于免疫共沉淀方法、免疫印跡、體內(nèi)和體外泛素化及流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡；所述化學(xué)生物學(xué)檢測方法包括但不限于熒光滴定法、BIAcore方法。

2.一種抑制E3泛素連接酶Smurf1泛素化降解其底物RhoB在用于抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物的篩選中應(yīng)用。

3.一種以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選的方法，其特征在于包括以下步驟：

(a)將候選化合物與物質(zhì)實體接觸；

(b)觀察候選化合物對所述一種抑制E3泛素連接酶Smurf1泛素化降解其底物RhoB的檢測結(jié)果的影響，所述候選化合物若能夠使細胞內(nèi)的檢測結(jié)果發(fā)生負向改變，即表征Smurf1泛素化降解RhoB的能力減弱，則表明該候選化合物是抗腫瘤的潛在藥物。

4.如權(quán)利要求3所述一種以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選的方法，其特征在于在步驟(a)中，所述物質(zhì)實體選自細胞或體外表達純化的蛋白質(zhì)。

5.如權(quán)利要求3所述一種以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選的方法，其特征在于在步驟(b)中，所述表明該候選化合物是抗腫瘤的潛在藥物后，進一步選擇能提高癌細胞中RhoB蛋白含量的化合物。

6.如權(quán)利要求5所述一種以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選的方法，其特征在于所述進一步選擇能提高癌細胞中RhoB蛋白含量的化合物的具體方法為：

(1)將候選化合物與不同類型的腫瘤細胞接觸；

(2)觀察候選化合物對不同類型的腫瘤細胞中RhoB蛋白含量的影響。

7.如權(quán)利要求6所述一種以抑制Smurf1泛素化降解RhoB為靶點的抗腫瘤藥物篩選的方法，其特征在于在步驟(2)中，所述觀察候選化合物對不同類型的腫瘤細胞中RhoB蛋白含量的影響后，對篩選出的且能夠提高不同腫瘤細胞中RhoB含量的潛在化合物進行進一步的細胞凋亡實驗和裸鼠成瘤模型實驗，以選出有效抗腫瘤的藥物。