[發明專利]一種茯苓多糖注射劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201410332928.X
• 申請日: 2014-07-14
• 公開（公告）號: CN104188900B
• 公開（公告）日: 2017-03-29
• 發明（設計）人: 林標聲;胡曉冰;楊生玉;陳小紅;朱德霞
• 申請（專利權）人: 龍巖學院
• 主分類號: A61K9/08
• 分類號: A61K9/08;A61K31/715;A61P35/00;A61P1/16;C08B37/00
• 代理公司: 廈門市新華專利商標代理有限公司35203
• 代理人: 朱凌

技術領域

本發明涉及一種茯苓多糖注射劑及其制備方法。

背景技術

茯苓（學名：Poria?cocos(Schw.)?Wolf.），藥用部位是多孔菌科真菌茯苓的菌核。具有利水滲濕，健脾，安神的功效。還可以制作成粉狀用來女士愛好的美白面膜。古人稱茯苓為“四時神藥”，因為它功效非常廣泛，不分四季，將它與各種藥物配伍，不管寒、溫、風、濕諸疾，都能發揮其獨特功效。茯苓味甘、淡、性平，入藥具有利水滲濕、益脾和胃、寧心安神之功用。現代醫學研究：茯苓能增強機體免疫功能，茯苓多糖有明顯的抗腫瘤及保肝臟作用。但虛寒精滑或氣虛下陷者忌服。?

目前市場上已有茯苓多糖口服液產品的開發，但未見到注射劑產品的開發。實踐表明，茯苓多糖的活性因口服會受到限制，而注射劑茯苓多糖通過靜脈注射或腹腔注射能夠直接進入人體直接起藥效作用，是口服的藥效不可比擬的。

發明內容

本發明要解決的技術問題之一，在于提供一種茯苓多糖注射劑的制備方法，其制備的注射劑適合肌肉注射，藥物吸收良好，無刺激性反應，使用安全可靠。

本發明是這樣實現上述技術問題之一的：

一種茯苓多糖注射劑的制備方法，所述方法步驟如下：

步驟一、羧甲基茯苓多糖的提取、純化：

A、將60-100℃烘干至恒重的茯苓粉末在索氏提取器中回流4-6h，除酯類物質，取藥渣，其中回流提取溶劑為乙酸乙酯，回流提取2~3次；

B、獲得的藥渣在回流裝置中沸水浴中回流提取4-6h，回流提取2~3次，離心取上清液；

C、上清液在旋轉蒸發儀中濃縮至含水率為10-15%，用Severge法除蛋白，取上清液加入乙醇沉淀多糖，0-4℃冰箱冷藏過夜，3000-4000r/min離心10-15min取沉淀物，低溫干燥得到水溶性茯苓粗多糖；

D、將所獲得的水溶性茯苓粗多糖依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，低溫干燥得到茯苓次多糖；

E、將茯苓次多糖加入高碘酸鈉氧化10-20min，pH?3～4酸解20-30mim，過濾得固體；添加NaOH水溶液溶解固體，堿化40-120min，再依次加入異丙醇、氯乙酸，40-50?℃快速攪拌溶解至樣品呈糊狀，過濾取沉淀；再加入稀鹽酸溶液,劇烈攪拌，加入100%乙醇過濾，取沉淀；將沉淀溶解于蒸餾水中，再用蒸餾水的3倍量體積的95%乙醇沉淀，過夜，離心取沉淀，低溫干燥得到羧甲基茯苓多糖粗品；

F、將羧甲基茯苓多糖粗品溶解于蒸餾水中，先進行DEAE-32纖維素層析柱，再進行SephadesG-200層析柱層析，將層析液透析脫鹽后，再用透析液的3倍量體積的95%乙醇沉淀，過夜，離心取沉淀，冷凍干燥得白色粉末狀固體物，即為羧甲基茯苓多糖純品；

步驟二、羧甲基茯苓多糖注射劑制備

G、取羧甲基茯苓多糖，加入注射用水充分溶解，加入針劑活性炭除熱源，充分攪拌20-30min，溶解完全后反復過濾至澄清，取濾液，濾液中加入苯甲醇、吐溫80，3000-4000r/min?離心10-15min取上清液，上清液用注射用水定容后，分裝于安瓶中，每瓶2mL，100℃下熱壓處理20-30min，冷卻后4℃冰箱冷藏保存，48-52h后燈光下檢查安瓶是否有沉淀，如有過濾除去，再灌封，121℃高壓濕熱滅菌20-30min，即為羧甲基茯苓多糖注射液，每毫升注射劑含羧甲基茯苓多糖2mg。

進一步地，所述步驟A中，茯苓粉末：乙酸乙酯=1：200-220，即1g茯苓粉末用200-220mL乙酸乙酯溶解，沸點80℃。

進一步地，所述步驟B中，茯苓粉末：水=1：250-300，即1g茯苓粉末用250-300mL水溶解，沸點100℃，離心3000-4000r/min,10-15min。

進一步地，所述步驟C中，旋轉蒸發儀轉速100-150r/min，65-75℃水浴；Severge法：加入溶液1/5-1/4體積的三氯甲烷，隨之再加入1/5-1/4體積的正丁醇，劇烈震蕩10-15min，重復三次，直至蛋白除盡；沉淀多糖的乙醇用量：3倍量溶液體積，95%濃度；低溫干燥溫度在40℃以下，在真空干燥箱中進行。

進一步地，所述步驟D中，無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌用量為茯苓粗多糖的2-3倍，即1g茯苓粗多糖依次用2-3mL的無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌；低溫干燥溫度在40℃以下，在真空干燥箱中進行。