[發(fā)明專利]基于菌絲球分散技術(shù)的檸檬酸黑曲霉種子連續(xù)培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410329652.X
• 申請日: 2014-07-11
• 公開（公告）號: CN104099253A
• 公開（公告）日: 2014-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 石貴陽;王寶石;張杰;胡志杰;蔣小東;孫福新;李贏;張梁;李由然;丁重陽;顧正華
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué);宜興協(xié)聯(lián)生物化學(xué)有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/48;C12R1/685
• 代理公司: 無錫華源專利事務(wù)所(普通合伙) 32228
• 代理人: 聶漢欽

1.一種基于菌絲球分散技術(shù)的檸檬酸黑曲霉種子連續(xù)培養(yǎng)方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將黑曲霉孢子液接種至種子培養(yǎng)基，培養(yǎng)20~32h，制備成熟的種子液；

（2）成熟的種子液經(jīng)過分散器處理，得到分散菌絲種子液；?

（3）將步驟（2）得到的部分分散菌絲種子液以5~15%（v/v）接種量轉(zhuǎn)接至發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)基還原糖濃度低于0.5%時發(fā)酵結(jié)束；

（4）將步驟（2）得到的部分分散菌絲種子液以5~15%（v/v）接種量接種至種子培養(yǎng)基，培養(yǎng)16~24h，制備得到下一級成熟的種子液，然后回到步驟（2），即實現(xiàn)黑曲霉種子連續(xù)培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟（1）中接種后黑曲霉孢子液濃度為40~55萬個/ml接種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟（1）和步驟（4）中的種子培養(yǎng)基的總糖8~12%，總氮0.15~0.4%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟（2）中成熟的種子液經(jīng)過分散器處理，菌體的菌球或菌塊平均直徑40~100um。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟（3）中的發(fā)酵培養(yǎng)基的總糖14~16%，總氮0.05~0.15%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基為淀粉質(zhì)原料液化液配制的培養(yǎng)基，原料包括玉米粉，木薯，紅薯。

7.根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項所述的方法，其特征在于其他菌絲經(jīng)過分散處理的微生物發(fā)酵，均適用本技術(shù)。