[發(fā)明專利]一種用于抑制VHL基因表達(dá)的抑制劑及其制備

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410311675.8
• 申請(qǐng)日: 2014-07-02
• 公開（公告）號(hào): CN104120146A
• 公開（公告）日: 2014-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 湯華;曹漪伊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶貝羿生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/85
• 分類號(hào): C12N15/85;C12N15/66;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 郭婧婧

1.一種用于抑制VHL基因表達(dá)的抑制劑，所述抑制劑為包含有miR-331-3p基因片段的表達(dá)載體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制劑，其特征在于，所述表達(dá)載體由pTARGET質(zhì)粒改造獲得，即在pTARGET質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)區(qū)域中插入一段包含miR-331-3p基因片段的插入序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制劑，其特征在于，所述插入序列的插入位點(diǎn)為Xho?I酶切位點(diǎn)和Sal?I酶切位點(diǎn)之間。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制劑，其特征在于，所述包含miR-331-3p基因片段的插入序列如SEQIDNO.1所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制劑，其特征在于，所述抑制劑的序列如SEQIDNO.4所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制劑的制備方法，其特征在于，通過PCR的方法在所述包含miR-331-3p基因片段的插入序列兩端添加酶切位點(diǎn)序列，采用酶切、連接的方法將所述miR-331-3p基因片段插入pTARGET質(zhì)粒載體，篩選、鑒定連接正確的連接產(chǎn)物為本發(fā)明的抑制劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一權(quán)利要求所述的抑制劑的用途，是用于抑制VHL基因的表達(dá)。

8.一種抑制VHL基因表達(dá)的方法，所述方法為將有效作用量的所述抑制劑施用于作用對(duì)象。