[發明專利]一種利用木糖產聚羥基烷酸酯菌群的篩選和馴化方法

有效

• 申請號: 201410302267.6
• 申請日: 2014-06-27
• 公開（公告）號: CN104031906B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: 賈曉強;劉英杰
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C12N13/00
• 分類號: C12N13/00;C12N15/01;C12N1/20;C12R1/01;C12R1/40
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 王麗

1.一種利用木糖產聚羥基烷酸酯菌群的篩選和馴化方法，其特征是：以富含混合菌群的活性污泥為原料，利用混合菌群產PHA的飽食饑餓馴化模式進行馴化，馴化過程中取樣，使用尼羅藍染色法進行PHA合成菌群的篩選；篩選得到的PHA高產菌群富集培養后回注到正在馴化中的體系中，對馴化中的菌群進行擾動；馴化結束后使用得到的混菌體系進行PHA發酵生產，發酵結束后進行PHA提取。

2.如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是所述的飽食饑餓馴化模式是包括進料、通氣，沉降和排水四個步驟為一個培養周期。

3.權如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是所述的尼羅藍篩選方法是取濃度梯度的細胞懸液均勻涂布到篩選培養基平板上，黑暗培養后置于365nm紫外光下照射，選擇熒光顆粒多的平板洗板，富集培養后接種到馴化體系中。

4.權如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是馴化培養基為：木糖1800mg/L，氯化銨170mg/L，磷酸氫二鉀90mg/L，磷酸二氫鉀35mg/L，硫酸鎂600mg/L，EDTA100mg/L，氯化鈣70mg/L，微量元素2mL/L，其中微量元素組成為：六水氯化鐵1000mg/L，硼酸150mg/L，六水氯化鈷150mg/L，四水氯化錳120mg/L，七水硫酸鋅120mg/L，二水鉬酸鈉60mg/L，五水硫酸銅30mg/L，碘化鉀30mg/L；pH6.6～6.7。

5.權如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是篩選培養基：蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化鈉2g/L，尼羅藍終濃度50mg/L，瓊脂20g/L；pH7.5。

6.權如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是發酵培養基：木糖20g/L，氯化銨2g/L，磷酸氫二鉀3.3g/L，硫酸鎂1.2g/L，微量元素10mL/L；pH8。

7.權如權利要求1所述篩選和馴化方法，其特征是獲得的混菌體系中主要優勢菌株為γ-Proteobacteria、Cellvibrio?sp.、Uncultured?bacterium和Pseudomonas?putida。