[發明專利]一種產黃曲霉毒素B1降解酶的菌株及其應用

在審

• 申請號: 201410281386.8
• 申請日: 2014-06-23
• 公開（公告）號: CN104498378A
• 公開（公告）日: 2015-04-08
• 發明（設計）人: 蔡俊;戴軍;王常高;杜馨;林建國;周安盛
• 申請（專利權）人: 湖北工業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/00;A23L1/015;C12R1/01
• 代理公司: 武漢帥丞知識產權代理有限公司 42220
• 代理人: 朱必武

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體而言，涉及一株產黃曲霉毒素解毒酶能力較強的細菌Sinomonas?sp.HSD8及其應用。

技術背景

黃曲霉毒素（aflatoxin）是一種有強烈生物毒性的化合物，常由黃曲霉及另外幾種霉菌在霉變的谷物中產生，如大米、豆類、花生等，是目前為止最強的致癌物質，而且其毒性遠遠高于氰化物、砷化物和有機農藥的毒性。當人攝入量大時，可發生急性中毒，出現急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。當微量持續攝入，可造成慢性中毒，生長障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。黃曲霉毒素主要有B₁、B₂、G₁與G₂等4種，又以B₁的毒性最強。一般在中性溶液中較穩定，在強酸性溶液中稍有分解，在pH9-10的強堿溶液中分解迅速。其純品為無色結晶、耐高溫，黃曲霉毒素B₁的分解溫度為268℃，所以一般的加熱不易破壞其結構。另外紫外線對低濃度黃曲霉毒素有一定的破壞性。糧食儲存不當，極容易發霉變黃，產生黃曲霉毒素。中國是一個農業大國，預防和消除黃曲霉毒素對糧食及農副產品的污染至關重要，對我國的經濟發展和人民健康將會起到重要作用。警惕黃曲霉毒素的危害，對我國而言已迫在眉睫。

隨著人們對于黃曲霉毒素對人類及動物健康造的巨大危害的逐步認識，人們越來越大力尋找可以解除黃曲霉毒素毒性或減少其在食品和飼料中的污染的方法。作物收割前的污染可以通過好的收割作業等加以預防，而收獲后的污染情況可以通過正確的處理、干燥、分類和改善儲存條件，如降低溫度和減少濕度來加以控制。然而，與農產品相關的許多污染是很難避免的，這就需要一個合適的去除黃曲霉毒素的方法。除了將黃曲霉毒素降低到安全極限以下，同時也需要滿足下列基本準則：

(1)不能造成其它毒性物質的產生或者留有仍然會對食品安全性造成威脅有毒的殘基。

(2)產品的營養成分不能被嚴重的破壞。

(3)不能改變產品的物理和感官狀態成分。

(4)必須是經濟和技術可行的。

(5)必須能夠破壞黃曲霉毒素產毒菌株的孢子和菌絲體，因為如果它們還殘存在產品中，在合適的條件下，可能會造成毒素的再生。

目前，通常使用的解毒方法都在于從食物中去除黃曲霉毒素或者在食品中將其破壞掉，主要可以分為物理、化學，生物學方法。其中生物法中的酶解法是最具潛力的方法。物理方法主要包括溶劑萃取、吸附、加熱，輻射、太陽照射等。化學方法去毒主要是使用化學試劑除去毒素。使用的化學試劑有次氯酸鈉、臭氧、過氧化氫、氫氧化鈉、氨水以及氯氣等。生物學方法主要包括生物化學、生物醫學和微生物發酵產酶來進行解毒。由于物理和化學方法對產品的色，香，味以及營養成分，如維生素、蛋白質等均有不同程度的破壞和不良影響，降低了產品品質，同時易產生副產物和處理劑殘留，且易被二次污染，對人和動物產生危害。此外，有些方法不適合大規模的生產，有些只適合一定物性的物料，去毒率不高、費時、費力且造成浪費。由于這些問題的存在，人們一直在尋找一種高效，無危害的去除毒素的方法，于是生物脫毒的方法應運而生。黃曲霉毒素的生物脫毒主要是采用微生物或其產生的酶來進行脫毒，生物脫毒的處理條件相對溫和，不會破壞產品的品質，而且有些還能增加產品的營養價值，此外生物酶具有作用專一性。應用專門分解黃曲霉毒素而對所降解產品的其他成份沒有作用的酶，這無疑是一種最理想的方式。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種產黃曲霉毒素降解酶能力較強的菌株及其應用，該酶可有效解決黃曲霉毒素污染的問題。

為了實現本發明，發明人通過大量試驗反復進行菌種篩選研究，并終于獲得了一株合成黃曲霉毒素降解酶能力較強的細菌Sinomonas?sp.HSD8已于2014年3月28日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地點為湖北省武漢市武漢大學，保藏編號為CCTCC?NO：M2014109。

本發明涉及的產黃曲霉毒素B1降解酶的細菌Sinomonas?sp.HSD8具有如下生物學特征：

形態學特征：菌落黃色，有光澤，扁平，呈圓形，表面及邊緣光滑，邊緣整齊，濕潤粘膩，容易挑起；正反面，邊緣與中央部位顏色一致。

生理特性：不僅可利用葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、糖蜜等碳源，還可利用玉米漿作為氮源。

代謝特性：代謝過程能積累產生黃曲霉毒素解毒酶。