[發明專利]一種密碼子植物化改造的PMI基因及其應用有效
| 申請號： | 201410276408.1 | 申請日： | 2014-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN104046636B | 公開（公告）日： | 2017-03-15 |
| 發明（設計）人： | 李莉;楊劍波;魏鵬程;宋豐順;李浩;楊亞春;倪大虎;汪秀峰;馬卉;秦瑞英;陸徐忠;倪金龍 | 申請（專利權）人： | 安徽省農業科學院水稻研究所 |
| 主分類號： | C12N15/31 | 分類號： | C12N15/31;C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京律譜知識產權代理事務所(普通合伙)11457 | 代理人： | 黃云鐸 |
| 地址： | 230031 *** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 密碼子 植物 改造 pmi 基因 及其 應用 | ||
1.一種密碼子植物化改造的PMI基因，其特征在于，該基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.一種表達盒，其特征在于，所述表達盒中包含權利要求1所述的PMI基因。
3.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體包含權利要求1所述的PMI基因或權利要求2所述的表達盒。
4.一種權利要求1-3所述的基因、表達盒或載體的應用，其特征在于，所述應用包括利用所述密碼子植物化改造的PMI基因作為篩選標記，獲得轉基因植物或植物部分。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述植物包括：糧食作物、蔬菜作物、花卉作物、能源作物。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述植物部分包括：細胞、原生質體、細胞組織培養物、愈傷組織、細胞塊、胚芽、花粉、胚珠、花瓣、花柱、雄蕊、葉、根、根尖、花藥和種子。
7.一種利用含有權利要求1中所述的密碼子植物化改造的PMI基因的表達載體pCAMBIA1381-plant?PMI，將外源基因導入水稻細胞的方法，包括下述步驟：
(1)將水稻種子去殼、滅菌后將胚分離出來，置于愈傷組織誘導培養基上以產生次級愈傷組織；
(2)將所述次級愈傷組織轉移至新的愈傷組織誘導培養基進行預培養，獲得愈傷組織；
(3)將步驟(2)中獲得的愈傷組織與農桿菌接觸15分鐘，其中，所述農桿菌中引入了所述表達載體，所述表達載體中攜帶所述密碼子植物化改造的PMI基因；
(4)將步驟(3)處理后的愈傷組織轉移到其上墊有無菌濾紙的培養皿中，21-23℃培養48小時；
(5)將步驟(4)處理后的愈傷組織置于前篩選培養基上培養5-7天；
(6)將步驟(5)處理后的愈傷組織轉移篩選培養基上，以獲得抗性愈傷組織；
(7)將所述抗性愈傷組織轉移到分化再生培養基中分化成苗；和
(8)將步驟(7)中所獲得的苗轉移到生根培養基中生根。
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