[發明專利]一種超高效液相-質譜法檢測血液中降血糖以及降血壓藥物的方法

有效

• 申請號: 201410273501.7
• 申請日: 2014-06-18
• 公開（公告）號: CN104133006A
• 公開（公告）日: 2014-11-05
• 發明（設計）人: 李清艷;喬湜;李松林;許海山;王偉;徐先發;劉國如;于紅燕;丁仁奎;劉永鎖
• 申請（專利權）人: 中國民用航空局民用航空醫學中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京慶峰財智知識產權代理事務所(普通合伙) 11417
• 代理人: 劉元霞;謝蓉

1.一種超高效液相-質譜法檢測血液中常見降血壓、降血糖藥物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

采用超高效液相色譜-串聯質譜法(UPLC-MS/MS)的多反應監測(MRM)模式，針對所選定的降血壓、降血糖藥物進行分時間段初篩檢測。

2.根據權利要求1的方法，其特征在于，所述方法還包括對上述步驟中初篩檢測陽性樣本進行復核的步驟，其中，所述復核步驟針對篩查檢測陽性樣本，進行超高效液相-質譜法檢測。

優選地，所述復核步驟中，以保留時間、兩對母離子/子離子對(優選還包括以豐度比和/或響應值增加進行復核。更優選地，所述復核步驟中，對于初篩檢測陽性樣本，在樣品預處理后，進行UPLC-MS/MS檢測，以保留時間、兩對母離子/子離子對(優選還包括以豐度比和/或響應值)增加進行復核。

優選地，所述方法還包括對上述復核后的樣本進行復檢的步驟。更優選地，通過采用高效液相-高分辨飛行時間串聯質譜法(HPLC-QTOF)進行復檢。

更優選地，所述復檢步驟中，采用高效液相-高分辨飛行時間串聯質譜法(HPLC-QTOF)進行復檢，以保留時間、精確分子量和/或同位素峰豐度比進行確認。

3.根據權利要求1或2的方法，其特征在于，所述初篩檢測法步驟中，以保留時間、一對母離子/子離子對進行篩查分析。

優選的液相條件為：ACQUITY?UPLC?HSS?C18柱(1.8μm×2.1mm×150mm)，流動相為含0.1％甲酸的5mM乙酸銨水溶液-含0.1％甲酸的乙腈溶液(60:40)，流速0.2mL/min；柱溫30℃；質譜條件為：離子源：ESI+，離子源溫度120℃；去溶劑化溫度350℃；正離子方式檢測；掃描方式：多反應監測(MRM)；液氮氣體流速650L/hr，毛細管電壓(capillary)3.0KV。

優選地，所述初篩檢測分時間段檢測。更優選地，所述步驟中的分段檢測可以分為6個時間段，優選可以為5個時間段，或者4個時間段。還更優選地，所述步驟中的檢測時間段分為：0-2分鐘，2-4分鐘，4-6分鐘，6-8分鐘，8-10分鐘，10分鐘以后，優選只檢測到10分鐘。或者檢測時間段分為：0-2.5分鐘，2.5-5分鐘，5-7.5分鐘，7.5-10分鐘，10分鐘以后，優選只檢測到10分鐘。或者檢測時間段分為：0-3分鐘，3-6分鐘，6-9分鐘，9分鐘以后，優選只檢測到9分鐘。

4.根據權利要求1-3任一項的方法，其特征在于，所述藥物為選自如下的31種藥物：

11種降糖藥物：二甲雙胍、格列美脲、瑞格列奈、格列喹酮、羅格列酮、西他列汀、吡格列酮、格列吡嗪、格列齊特、格列本脲、那格列奈；

19種降壓藥物：氨氯地平、厄貝沙坦、硝苯地平、培哚普利、吲噠帕胺、依那普利、拉貝諾爾、尼卡地平、拉西地平、尼群地平、非洛地平、福辛普利、坎地沙坦酯、貝那普利、纈沙坦、維拉帕米、氯沙坦、阿替洛爾、地爾硫卓；

1種降脂藥：阿托伐他汀。

5.權利要求1-4任一項的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)檢測目標化合物的確認

設定31種藥物作為檢測目標化合物，分別是：

11種降糖藥物：二甲雙胍、格列美脲、瑞格列奈、格列喹酮、羅格列酮、西他列汀、吡格列酮、格列吡嗪、格列齊特、格列本脲、那格列奈；

19種降壓藥物：氨氯地平、厄貝沙坦、硝苯地平、培哚普利、吲噠帕胺、依那普利、拉貝諾爾、尼卡地平、拉西地平、尼群地平、非洛地平、福辛普利、坎地沙坦酯、貝那普利、纈沙坦、維拉帕米、氯沙坦、阿替洛爾、地爾硫卓；

1種降脂藥：阿托伐他汀；

(2)樣品處理：采用有機溶劑沉淀蛋白法處理樣品；

(3)初篩檢測：采用超高效液相色譜-串聯質譜法(UPLC-MS/MS)的多反應監測(MRM)模式分時間段進行初篩檢測；

(4)對步驟(3)中初篩檢測陽性樣本進行復核：對于篩查檢測陽性樣本，處理濃縮后進行UPLC-MS/MS檢測；任選地，和

(5)對步驟(4)中復核檢測陽性樣本進行復檢，可以采用高效液相-高分辨飛行時間串聯質譜法(HPLC-QTOF)進行復檢。