[發(fā)明專利]尿酸酶多囊脂質(zhì)體及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410271072.X
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號: CN104013576B
• 公開（公告）日: 2017-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張景勍;熊華蓉;周岐新;周云莉;何丹;胡雪原
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K38/44;A61P19/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥制劑領(lǐng)域，涉及尿酸酶多囊脂質(zhì)體及其制備方法。

背景技術(shù)

尿酸是人體嘌呤堿基分解代謝終產(chǎn)物，經(jīng)腎臟排泄。體內(nèi)尿酸生成超過腎臟排泄時(shí)，血清尿酸會顯著升高，造成高尿酸血癥。高尿酸血癥與痛風(fēng)、心血管疾病、腫瘤裂解綜合征及腎臟疾病的引發(fā)或加劇密切相關(guān)。因此，需要開發(fā)安全有效的藥物來治療高尿酸血癥。尿囊素的優(yōu)良水溶性和腎臟對其高效的排泄能力使尿酸酶可能成為治療高尿酸血癥的理想藥物。臨床研究表明尿酸酶可快速高效降低血尿酸，且專一性高，在治療腫瘤溶解綜合征的高尿酸血癥時(shí)，尿酸酶比別嘌呤醇更安全有效。尿酸酶還可以用于防治腫瘤化療時(shí)產(chǎn)生的高尿酸血癥，也可用于治療痛風(fēng)，故將其用作降低血漿尿酸的藥物存在巨大需求。多囊脂質(zhì)體作為新型脂質(zhì)體，主要用于運(yùn)載親水性化學(xué)藥物(阿米卡星，嗎啡，順鉑，阿昔洛韋等)和小分子肽(干擾素，胰島素樣生長因子，載脂蛋白E肽鏈和人表皮生長因子等)，注射后，作為藥物貯庫隨時(shí)間緩慢釋放被包封的藥物達(dá)到緩釋長效的作用。尿酸酶為大分子藥用酶，其本身具有體內(nèi)外活性低，體內(nèi)生理?xiàng)l件下易降解，具有免疫原性等缺點(diǎn)，所以有必要研制能提高尿酸酶活性且具有緩釋效果的尿酸酶多囊脂質(zhì)體。經(jīng)查詢專利及文獻(xiàn)，目前尚無藥用酶多囊脂質(zhì)體的任何研究報(bào)道，更無尿酸酶多囊脂質(zhì)體的任何研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有活性高、免疫原性低和緩釋效果的尿酸酶多囊脂質(zhì)體及其制備方法。尿酸酶多囊脂質(zhì)體具有給藥頻率低，刺激性小，免疫原性低的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明制備得到的尿酸酶多囊脂質(zhì)體可用于治療高尿酸血癥、痛風(fēng)等。尿酸酶多囊脂質(zhì)體能克服尿酸酶在體內(nèi)活性低，循環(huán)半衰期較短，易誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生免疫原性和抗原反應(yīng)等缺點(diǎn)。尿酸酶多囊脂質(zhì)體可以保持較長時(shí)間的有效血藥濃度，有效地提高尿酸酶的活性和穩(wěn)定性，并能降低其免疫原性。本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體制備工藝簡單，成本較低，易于控制，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體，其特征在于制劑中各組分重量百分比為：尿酸酶1-3份，磷脂1-3份，膽固醇1-3份，三油酸甘油酯1-3份，葡萄糖(I)2-6份，泊洛沙姆F-683-7份，泊洛沙姆F-12715-30份，緩沖液(I)80-120份，L-賴氨酸1-3份，葡萄糖(II)10-15份，緩沖液(II)200-500份，緩沖液(I)和緩沖液(II)指硼酸鹽緩沖液或Tris緩沖液或Bicine緩沖液，pH為8-9。本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體，可以采用復(fù)乳法制備，步驟如下：(1)初乳制備：取處方量的尿酸酶、泊洛沙姆F-127、泊洛沙姆F-68、葡萄糖(I)溶于處方量的內(nèi)水相中的緩沖液中，稱取處方量的磷脂、膽固醇、三油酸甘油酯溶于乙醚作為油相，將緩沖液(I)與油相混合，在渦旋條件下制得W/O型初乳；(2)復(fù)乳制備：取處方量的L-賴氨酸與葡萄糖(II)溶于處方量的緩沖液(II)，將初乳快速加入到外水相中，機(jī)械分散制成W/O/W型復(fù)乳；(3)多囊脂質(zhì)體制備：將復(fù)乳于室溫下減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醚，即得。

用本發(fā)明制得的尿酸酶多囊脂質(zhì)體的平均粒徑約為23μm，95％以上的尿酸酶多囊脂質(zhì)體的粒徑在5～40μm范圍(圖1)。本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體的體內(nèi)藥物代謝實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明尿酸酶多囊脂質(zhì)體在體內(nèi)可以緩慢釋放藥物，與普通尿酸酶脂質(zhì)體(藥時(shí)曲線下面積AUC_(0-∞)為196.4U/L*h；半衰期t_1/2為2.6h)相比，尿酸酶多囊脂質(zhì)體(AUC_(0-∞)為361.8Ug/L*h；t_1/2為4.5h)具有明顯的緩釋作用和較高的生物利用度(圖2)。本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體的體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明尿酸酶多囊脂質(zhì)體降尿酸的效果明顯優(yōu)于游離尿酸酶，尿酸酶多囊脂質(zhì)體將高尿酸血癥大鼠體內(nèi)的尿酸濃度降到正常水平只需要9小時(shí)左右，而游離尿酸酶卻需要36小時(shí)(圖3)。本發(fā)明提供的尿酸酶多囊脂質(zhì)體的免疫原性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明大鼠靜脈注射尿酸酶多囊脂質(zhì)體后體內(nèi)產(chǎn)生的抗體水平明顯低于靜脈注射游離尿酸酶后體內(nèi)的抗體水平，21天時(shí)大鼠靜脈注射游離尿酸酶是靜脈注射尿酸酶多囊脂質(zhì)體后體內(nèi)的抗體量的2倍多，說明尿酸酶多囊脂質(zhì)體的免疫原性低，與游離尿酸酶相比臨床應(yīng)用更好(圖4)。